[发明专利]将人脂肪干细胞分离并诱导成胰岛β细胞的培养基及其使用方法在审
| 申请号： | 201510277207.8 | 申请日： | 2015-05-27 |
| 公开（公告）号： | CN104862268A | 公开（公告）日： | 2015-08-26 |
| 发明（设计）人： | 边曙光 | 申请（专利权）人： | 贵州北科泛特尔生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/071 | 分类号： | C12N5/071 |
| 代理公司： | 贵阳中新专利商标事务所 52100 | 代理人： | 李亮;程新敏 |
| 地址： | 550005 贵*** | 国省代码： | 贵州;52 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 脂肪 干细胞 分离 诱导 胰岛 细胞 培养基 及其 使用方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种将人脂肪干细胞分离并诱导成胰岛β细胞的培养基，其特征在于：包括DMEM培养基，其中激活素为3mmol/L，反式维甲酸为1umol/L，EGF为100ng/ml，bFGF为10ng/ml ，胰高血糖素样肽1为10ng/ml，尼克酰胺为10mmol/L。
2.一种采用如权利要求1所述的培养基将人脂肪间充质干细胞诱导成胰岛素分泌细胞的方法，其特征在于：将脂肪组织消化后，进行原代细胞培养及传代培养；将传3代的脂肪间充质干细胞，采用质量百分比为0.25% Trypsin-EDTA溶液消化收集细胞，制备细胞悬液，细胞计数板计数活细胞密度，并调整密度至1 X 104/cm2，接种于24孔板内，制备细胞爬片；待细胞达到75%-85融合后，生长旺盛时用上述培养基进行诱导分化，诱导时间为7天，将诱导后的细胞进行鉴定。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述的细胞鉴定方法为双硫腙染色反应，流式细胞术检测胰岛阳性细胞。
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