[发明专利]人胚肾细胞HEK293T电转染的方法在审
申请号: | 201510277504.2 | 申请日: | 2015-05-27 |
公开(公告)号: | CN104846016A | 公开(公告)日: | 2015-08-19 |
发明(设计)人: | 周磊;李强;李一星 | 申请(专利权)人: | 广西大学 |
主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87 |
代理公司: | 广西南宁公平专利事务所有限责任公司 45104 | 代理人: | 杨立华 |
地址: | 530004 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 人胚肾 细胞 hek293t 转染 方法 | ||
1.一种人胚肾细胞HEK293T电转染的方法,其特征在于采用低渗透压的电转染缓冲液,对人胚肾细胞HEK293T进行一次放电;所述电转染缓冲液的渗透压为90~280mOsmol/kg,一次放电的电压为130~810V,持续时间为45~75μs。
2.根据权利要求1所述的人胚肾细胞HEK293T电转染的方法,其特征在于:所述电转染缓冲液的渗透压为200~280mOsmol/kg。
3.根据权利要求2所述的人胚肾细胞HEK293T电转染的方法,其特征在于:所述一次放电的电压为100~200V或200~300V或300~400V或400~600V,持续时间为75μs。
4.根据权利要求3所述的人胚肾细胞HEK293T电转染的方法,其特征在于:所述电转染缓冲液的渗透压为250mOsmol/kg,一次放电的电压为130V或260V或390V或520V,持续时间为75μs。
5.根据权利要求4所述的人胚肾细胞HEK293T电转染的方法,其特征在于:所述电转染缓冲液由低渗透压溶液和等渗透压溶液配制而成;所述低渗透压溶液组成为KCl 25mM、KH2PO4 0.3mM、KHPO 0.85mM、肌醇90mOsmol/kg,pH7.1~7.3,电导率,25度3.2~3.8mS/cm);所述等渗透压溶液组成为KCl 25mM、KH2PO4 0.3mM、K2HPO4 0.85mM、肌醇280mOsmol/kg,pH7.1~7.3,电导率,25度3.2~3.8mS/cm。
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