[发明专利]一种汉防己中生物碱的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物有效成分的提取，尤其是一种汉防己中生物碱的提取方法。

背景技术

汉防己又名粉防己为防己科植物（Stephania tetrandra S. Moore）的根，生长于山野丘陵地、草丛或矮林边缘，分布浙江、安徽、江西、福建、广东、广西等地。汉防己是祛风湿、解热阵痛药物，主治水肿、小便不利、风湿关节疼痛、高血压等病，其有效成分为生物碱，总生物碱含量为1.5-2.3%，其中主要成分是汉防己甲素和汉防已乙素，含量分别约为1%和0.5%。

汉防已甲素(Tetrandrine，汉防已碱，粉防已碱)，其分子式：C₃₈H₄₂N₂O₆，分子量：622.73。它是一种无色针晶，不溶于水和石油醚，易溶于乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醚和三氯甲烷等有机溶剂及稀酸水中，可溶于苯，mp 216 ℃，有双熔点现象，自丙酮中结晶者，150 ℃左右熔后加热又固化，至213 ℃复熔的化合物。汉防已甲素具有抗过敏作用、抗心绞痛作用、抗肿瘤作用、抗高血压作用，同时对白血病，神经性疼痛，心率失常等病亦有较好的治疗作用。汉防已乙素(Fangchinoline, 防已诺林碱，去甲粉防已碱)，其分子式：C₃₇H₄₀N₂O₆，分子量：608.71，其溶解行为与汉防已甲素相似，因有一个酚羟基，故极性较汉防已甲素稍高，在苯中的溶解度小于汉防已甲素而在乙醇中又大于汉防已甲素，它具有抗炎镇痛、降压、抗肿瘤作用。

随着汉防己化学成分的不断深入研究，将有限的汉防己资源分离纯化成更多、更纯的有效成分可具有广泛的经济社会效益，汉防已中生物碱类成分的提取、纯化工艺已受到越来越多国内外科研人员的关注。但目前汉防己有效成分生物碱的提取、纯化技术尚未成熟，仍然还存在着以下问题：（1）纯化过程使用苯、氯仿等作为萃取试剂，成本高且毒性大，对生产环境和操作人员身体健康都有危害；（2）使用氨水碱化，不仅气味大且成本高；（3）操作复杂、生产成本高；（4）总生物碱的收率低；（5）产品含有较多杂质，纯度低，不能符合标准品的要求。

发明内容

针对上述存在的问题，本发明将提供一种从汉防己中提取汉防已甲素和汉防已乙素的方法。本发明方法提取工艺简单，生产成本低，得到的汉防已甲素和汉防已乙素纯度很高，可达到标准品的要求。

本发明采用的技术方案为：

一种汉防己中生物碱的提取方法，其特征在于：包括以下步骤：

（1）先将汉防已药材切碎，在汉防已药材中加入氧化钙粉混合均匀，碱化1-2h后，转移至提取罐，再加入乙醇，在温度为50-60℃的条件下，启动泵将上层乙醇送入提取罐的底部循环提取2-3次，每次循环提取2-3h,过滤，合并提取液；所述的汉防已药材、氧化钙粉、乙醇的重量份数比为：100∶5-6∶400-600；

（2）将上述提取液在温度为70-80℃、真空度为0.08-0.09MPa的条件下，减压浓缩至无醇味出料，在浓缩液中加入其体积0.3-0.5倍的稀盐酸溶液，用均质机搅拌使浓缩液充分溶解，静置20-24h，过滤，滤液用8-10%的NaOH溶液调节pH至10-11，静置10-12h，过滤，得到的固体物在温度为70-80℃烘干3-5h，得到汉防己总碱；

（3）将上述得到的总碱用重量比为1∶20-30的甲醇溶解，经过滤，得到的滤液通过中压层析柱吸附，用甲醇与水体积比为3:1配成洗脱液，再进行洗脱，用紫外检测器控制检测波长为254-282nm,当吸光度AU值大于0.2时，开始收集汉防已甲素，直至AU值降低至0.1时停止，再收集汉防已乙素，直至收集液不发生反应,将收集的汉防已甲素和汉防已乙素分别经过真空减压浓缩，在温度为70-80℃、真空度为0.08-1.00MPa的条件下真空干燥，得到汉防已甲素和汉防已乙素粗产品，并回收甲醇；

（4）将上述得到的汉防已甲素和汉防已乙素粗产品分别用75%乙醇按常规方法重结晶，过滤，得到的结晶物分别在70-80℃或冷冻干燥后，即可得到高纯度汉防已甲素和汉防已乙素。

以上所述一种汉防己中生物碱的提取方法，步骤（3）的洗脱液先用二乙胺调节pH值至8-10。

以上所述一种汉防己中生物碱的提取方法，步骤（1）所述的乙醇浓度为85-90%。

以上所述一种汉防己中生物碱的提取方法，所述的稀盐酸浓度为6-8%。