[发明专利]一株重组大肠杆菌的构建及其合成(S)-2-羟基-3-苯基丙酸的方法

权利要求书

1.一种L-乳酸脱氢酶基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示。

2.携带权利要求1所述的L-乳酸脱氢酶基因的重组表达质粒pET-28a-ldhL。

3.含有权利要求2所述的载体的重组大肠杆菌。

4.权利要求3所述的重组大肠杆菌的构建方法，该方法包括以下步骤： 

（1）根据大肠杆菌的密码子偏好性对巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium Z2013513）CCTCC NO：M2013244 L-乳酸脱氢酶基因进行密码子优化；

（2）将密码子优化的L-乳酸脱氢酶基因导入pET-28a(+)载体得到重组表达载体pET-28a-ldhL；

（3）将得到的重组表达载体pET-28a-ldhL转化E. coli BL21(DE3)后得到重组大肠杆菌。

5.权利要求3所述的重组大肠杆菌在转化苯丙酮酸合成(S)-2-羟基-3-苯基丙酸中的应用。

6.权利要求3所述的重组大肠杆菌转化苯丙酮酸合成(S)-2-羟基-3-苯基丙酸的方法，该方法包括以下步骤：

（1）全细胞菌悬液制备，将重组大肠杆菌单菌落接种至种子培养基中活化，再将此种子液接种至扩大培养基中培养至对数中期，添加产酶诱导剂IPTG，低温诱导并收集菌体以获得全细胞菌悬液；

（2）流加底物苯丙酮酸和葡萄糖，全细胞生物转化合成(S)-2-羟基-3-苯基丙酸。