[发明专利]一种人基因组DNA34个基因座的复合扩增试剂盒有效
申请号: | 201510280282.X | 申请日: | 2015-05-27 |
公开(公告)号: | CN105018597B | 公开(公告)日: | 2018-04-17 |
发明(设计)人: | 李政;张兹均;潘立鹏;邓继良 | 申请(专利权)人: | 宁波海尔施基因科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6879 | 分类号: | C12Q1/6879;C12Q1/6888;C12Q1/686 |
代理公司: | 余姚德盛专利代理事务所(普通合伙)33239 | 代理人: | 胡小永 |
地址: | 315040 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 基因组 dna34 基因 复合 扩增 试剂盒 | ||
1.一种采用6色荧光系统的人基因组DNA34个基因座的复合扩增试剂盒,其特征在于,所述复合扩增试剂盒复合扩增下列34个STR基因座:DYS456、DYS458、DYS437、DYS439、DYS392、DYS385a/b、DYS393、DYS391、DYS390、DYS635、DYS438、DYS389I、DYS19、GATA-H4、DYS389II、DYS448、TPOX、D3S1358、D5S818、FGA、CSF1PO、D8S1179、D7S820、TH01、VWA、D13S317、D16S539、D18S51、D21S11、Y-indel、D2S1338、D19S433及Amelogenin;
所述34个STR基因座采用特异性寡核苷酸扩增引物对复合扩增;所述试剂盒包括用于扩增所述34个STR基因座的引物,其序列如下表所示:
上述引物对中,其中每对引物中有一条引物的5’端用荧光染料标记,其中蓝色荧光染料为FAM、绿色荧光染料为VIC、黄色荧光染料为NED、红色荧光染料为ROX、 紫色荧光染料为AF594;所述试剂盒还包括内标,所述内标选用橙色荧光染料Atto 633;
用于扩增Y-indel、D3S1358、TH01、D21S11、D18S51、D19S433、DYS439基因座的每对引物中的一条的5’端采用FAM标记;用于扩增DYS438、DYS389I、DYS448、DYS389II、DYS19、GATA-H4、DYS458 基因座的每对引物中的一条的5’端采用VIC标记;用于扩增AMEL、D5S818、D13S317、D7S820、D16S539、CSF1PO、D2S1338基因座的每对引物中的一条的5’端采用NED标记;用于扩增DYS437、VWA、D8S1179、TPOX、FGA、DYS456基因座的每对引物中的一条的5’端采用ROX标记;用于扩增DYS393、DYS391、DYS390、DYS635、DYS392、DYS385a/b基因座的每对引物中的一条的5’端采用AF594标记。
2.根据权利要求1所述的一种采用6色荧光系统的人基因组DNA34个基因座的复合扩增试剂盒,其特征在于,所述的试剂盒包括如下组分:无核酸酶水、PCR缓冲液、SureID Compass Primer Mix和人基因组阳性对照;
其中所述无核酸酶水是指无RNA酶和DNA酶的超纯水;
所述的PCR缓冲液包括了DMSO 10mM、Tris-buffer 125mM、氯化钾125mM、硫酸铵65mM;
所述SureID Compass Primer Mix包括同时扩增34个基因座的所有引物、三磷酸脱氧核苷酸7.5mM、Taq酶5U/μl、氯化镁7.5mM、BSA2.5mg/ml;所述SureID Compass Primer Mix中各引物浓度见下表所示:
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