[发明专利]一种百两金皂苷B原料或其制剂的检测方法

权利要求书

1.一种使用高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)测定百两金皂苷B原料或其制剂的定量分析方法，其特征在于以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为30∶70～40∶60的乙腈-水为流动相；用蒸发光散射检测器检测，理论板数按百两金皂苷B计算不得低于4000；其主要步骤包括色谱系统适用性试验、对照品和样品溶液制备、进样分析测定并计算含量。

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述百两金皂苷B原料采用如下方法制备：将百两金粉碎，用50％～80％的乙醇提取，将提取液减压浓缩，上大孔吸附树脂，分别用水和30％乙醇冲洗除杂，再用80％乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩干燥，上硅胶柱层析，以体积比为70∶30的乙酸乙酯-甲醇洗脱，合并富含百两金皂苷B的流份，除去溶剂，甲醇重结晶，干燥、即得；其制剂为采用常规方法制备的胶囊或片剂。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述百两金皂苷B对照品是采用制备型高效液相色谱仪对百两金皂苷B原料进行分离纯化而得，其制备的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；体积比为60∶40～70∶30的甲醇-水为流动相；在205nm波长下监测；其供试品采用制备液相使用的流动相配制成饱和溶液，取上清液进样，收集目标峰流出液，浓缩、干燥、检查纯度，即得。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于所述百两金皂苷B原料或其制剂的供试品溶液是用50％～70％的甲醇或乙醇水溶液作为溶剂提取。

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述采用HPLC-ELSD法测定百两金皂苷B原料或其制剂含量的方法包括如下步骤和优化条件：

照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定：

色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水(35∶65)为流动相；蒸发光散射检测器检测，理论板数按百两金皂苷B计算不得低于4000。

对照品溶液制备取百两金皂苷B对照品适量，精密称定，加50％甲醇制成每1ml含0.3mg的百两金皂苷B对照品溶液，即得。

供试品溶液制备取百两金皂苷B原料30mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入50％乙醇适量，超声处理使溶解，用50％乙醇稀释至刻度，摇匀，过滤或离心，取续滤液或上清液，即得。

测定方法分别精密吸取对照品溶液5μL、20μL；供试品溶液10μL；注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得。