[发明专利]从红曲粉中分离高纯度内酯型洛伐他汀的方法

说明书

技术领域

[本发明涉及红曲粉中分离内酯型洛伐他汀的新方法，尤其涉及利用柱层析硅胶解析分离高纯度内酯型洛伐他汀的方法，属于有效物质的提取分离纯化领域。

背景技术

洛伐他汀是一种常见的治疗高脂血症药物，1976年左右由日本生物化学家远藤章（Endō Akira）首次从中国红曲粉中发现并分离得到。它是羟甲基戊二酰基辅酶A还原酶（HMGR）抑制剂，可从根源上抑制胆固醇的合成。在八十年代上市成为新型调血脂药，曾用商品名为明维欣、洛特、欣露等，其疗效独特，被誉为治疗心血管系统疾病的里程碑，用于治疗高胆固醇血症和混合型高脂血症。目前，用洛伐他汀或以其为中间体合成的他汀类药物仍为治疗高脂血症的主打药品。现代研究表明，洛伐他汀除了可以治疗许多心脑血管疾病以外，它还有抗炎，抗细胞增殖分化，抗肿瘤，治疗骨质疏松等作用，具有极高的实用价值和经济价值。

现有的洛伐他汀的提取精制工艺主要有两种：一是以Merk公司为代表的一步或两步硅胶层析法或树脂吸附法，该法虽然终产品质量较高，但步骤多、操作复杂，不利于大规模工业化生产。另一种是直接利用溶媒转相结晶法，该法虽然操作简便，但最大缺点是粗粉结晶收率只有50%左右。中国专利CN102432573A公开了“一种制备洛伐他汀的方法”，以市售红曲发酵物为原料，用乙醇溶液40~60℃下回流，再用超滤膜两次过滤，最后用大孔树脂吸附，蒸馏水进行反冲，乙醇溶液洗脱，收集洗脱流出液，减压蒸发浓缩而得。该工艺不仅过程复杂，而且超滤膜价格较贵，成本高；再有大孔树脂第一次全吸附，检测到流出液有洛伐他汀出来时停止过柱，会损失一些洛伐他汀，而且不能保证洛伐他汀会吸附完全，第二次用蒸馏水解吸杂质，也会损失一些洛伐他汀；最后用45%乙醇溶液将吸附在树脂上的洛伐他汀解吸下来，过程复杂漫长，耗时，不容易掌控洗脱程度，浪费水和酒精，洛伐他汀损失较大，产率低，生产成本高，不利于工业生产。

发明内容

本发明的目的是针对现有的提取洛伐他汀方法的不足，提供一种生产工序简易可行，耗时短，操作简便、可控性好，原料药利用率高，生产成本低，节能环保的制备内酯型洛伐他汀的方法。

一、内酯型取洛伐他汀的提取

本发明提取内酯型取洛伐他汀的方法，包括以下工艺步骤：

（1）洛伐他汀粗提物浸膏的制备：以市售红曲粉为原料，用乙醇溶液于70~80℃下回流提取3~8h；然后在0.05~0.09Mpa下用抽滤装置趁热抽滤，得滤液和滤渣；滤液经浓缩后得洛伐他汀粗提物浸膏；滤渣回收后可作动物饲料添加剂或用作色素提取原料。乙醇溶液的体积分数为40%~100%；红曲粉与乙醇溶液的配比为1:25~1:50 g/mL。

（2）洛伐他汀粗提物浸膏中单体内酯型洛伐他汀的分离：将洛伐他汀粗提物浸膏与柱层析硅胶以1:0.5~1:3的质量比拌样后烘干，再用拌样柱层析硅胶9~12倍质量的柱层析硅胶装柱，然后用石油醚和乙酸乙酯（体积比为1:1~1:2）为流动相，在0.5~5mL/min的流速下冲柱洗脱，每1~3.5mL为一个流分，并依次编号；流动相洗脱至第一条红色带或第二条黄色带流出时，停止冲柱，用薄层色谱检测，合并相同成分，得到纯度较高的羽状白色内酯型洛伐他汀结晶。

本发明的原理是：根据洛伐他汀含有羟基的化合物在乙醇溶液中良好的溶解性来提取红曲中的洛伐他汀。红曲中含有几乎等量的酸型和内酯型洛伐他汀，在高温条件下用乙醇回流时，红曲中的酸型洛伐他汀几乎会全部转化为稳定的内酯型，即常见的洛伐他汀，而内酯型的洛伐他汀由于稳定且极性较酸型结构小，所以在柱层析硅胶柱上易于分离。因此，乙醇高温回流提取后得到的粗提物中含大量的内酯型洛伐他汀，再利用柱层析硅胶的极性吸附和流动相的极性解吸原理，将粗提物中的内酯型洛伐他汀一次性全部分离出来。

二、内酯型取洛伐他汀产品的鉴定

（1）薄层色谱鉴定

用0.3×100mm的毛细管，将红曲中分离的白色结晶和2mg/mL的内酯型洛伐他汀标准品（购自四川标准物质中心，批号为130320）对比点样于25.4×76.2mm的自制硅胶薄层板上，展开剂为石油醚:乙酸乙酯=1:4，紫外灯254nm，测得Rf值都为0.69；经5%硫酸乙醇显色后都为红褐色，如附图1。从附图1可见，本发明制备的红曲分离品和内酯型洛伐他汀标准品的薄层色谱特征相同。

（2）¹H NMR结构鉴定