[发明专利]用于非酒精性脂肪肝相关目的基因多态性检测方法及其引物,以及试剂盒有效
申请号: | 201510287499.3 | 申请日: | 2015-05-29 |
公开(公告)号: | CN105039513B | 公开(公告)日: | 2018-12-28 |
发明(设计)人: | 周永健;聂玉强;李瑜元;王红;杜艳蕾;陈慧婷;李玉碧 | 申请(专利权)人: | 广州市第一人民医院 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12N15/11 |
代理公司: | 天津市北洋有限责任专利代理事务所 12201 | 代理人: | 罗伟平;潘俊达 |
地址: | 510000 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 酒精性 脂肪肝 相关 目的 基因 多态性 检测 方法 及其 引物 以及 试剂盒 | ||
1.用于非酒精性脂肪肝相关目的基因多态性检测方法的引物,其特征在于:
所述的相关目的基因为三类,分别为胰岛素敏感基因,参与氧化活性代谢和细胞因子通路基因,以及参与肝脏脂肪代谢基因;
所述的胰岛素敏感基因包括为PPARG 基因、ADIPOQ 基因、ADIPOR2 基因;
所述的参与氧化活性代谢和细胞因子通路基因为FDFT1 基因、TNF 基因、AGTR1 基因、PNPLA3 基因;
所述的参与肝脏脂肪代谢基因为PEMT 基因、MTTP 基因;
所述的PPARG 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示
所述的ADIPOQ 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示
所述的ADIPOR2 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示
所述的FDFT1 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示
所述的TNF 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示
所述的AGTR1 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示
所述的PNPLA3 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示
所述的PEMT 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示
所述的MTTP 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示。
2.用于非酒精性脂肪肝相关目的基因多态性检测的试剂盒,其特征在于,包括以下试剂:
(1)PCR 扩增试剂,包括PCR 引物、DNA 聚合酶、dNTPs、PCR 反应缓冲液;所述PCR 引物是序列为
所述的PPARG 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示
所述的ADIPOQ 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示
所述的ADIPOR2 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示
所述的FDFT1 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示
所述的TNF 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示
所述的AGTR1 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示
所述的PNPLA3 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:7所示
所述的PEMT 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:8所示
所述的MTTP 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:9所示;
(2)PCR 产物纯化试剂,包括SAP和核酸外切酶Ⅰ;
(3)单碱基延伸反应试剂,包括:延伸引物、单碱基延伸酶、ddNTPs、延伸反应缓冲液;所述单碱基延伸酶是TaqDNA 聚合酶;所述延伸引物为如下所示引物中的一条或多条:
所述的PPARG 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:19所示
所述的ADIPOQ 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:20所示
所述的ADIPOR2 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:21所示
所述的FDFT1 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:22所示
所述的TNF 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:23所示
所述的AGTR1 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:24所示
所述的PNPLA3 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:25所示
所述的PEMT 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:26所示
所述的MTTP 基因的引物其核苷酸序列如SEQ ID NO:27所示;
所述ddNTPs进行荧光标记。
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