[发明专利]一种动物多肽的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及动物多肽提取技术领域，特别是涉及一种动物多肽的提取方法。

背景技术

肽是涉及生物体内多种细胞功能的生物活性物质。截止2003年9月，生物体内已发现几百种肽，是机体完成各种复杂的生理活性必不可少的参与者。所有细胞都能合成多肽物质，其功能活动也受多肽的调节。它涉及激素、神经、细胞生长和生殖各领域，其重要性在于调节体内各个系统器官和细胞。酶法多肽的生理和药理作用主要是激活体内有关酶系，促进中间代谢膜的通透性，或通过控制DNA转录或翻译而影响特异的蛋白合成，最终产生特定的生理效应或发挥其药理作用。肽优于氨基酸，一是较氨基酸吸收快速；二是以完整的形式被机体吸收；三是主动吸收(氨基酸属被动吸收)；四是低耗，与氨基酸比较，肽吸收具有低耗或不需消耗能量的特点，肽通过十二指肠吸收后，直接进入血液循环，将自身能量营养输送到人体各个部位；五是肽吸收较氨基酸，具有不饱和的特点；六是氨基酸只有20种，功能可数，而肽以氨基酸为底物，可合成上百上千种。

目前，国内外研发生产的肽主要有三种。第一种是以植物蛋白质为原料加工成的钛制品，通称为植物多肽。目前国内外比较大的企业现行的肽制品主要是植物多肽。由于大豆类植物本身含蛋白质多，常为植物多肽的主要原料。但是由于豆类抗胰酶类强，往往由于酶解不彻底，影响产品的含肽量；此外，植物多肽的加工工艺、设备较为复杂，导致生产成本较高。第二种是以动物蛋白质为原料加工生产的肽，通称为动物多肽。动物多肽的原料来源主要是海洋生物和陆地生物。第三种是用已知肽的分子量和特殊功能，通过人工合成的方式生产的肽，这种合成肽是疫苗和治疗某种疾病的特殊药品，由于这种肽的生产设备和工艺要求特别严格，生产成本昂贵，临床观察期长，很难成为中小企业的产品。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中存在的技术缺陷，而提供一种动物多肽的提取方法，该提取工艺能够在保证动物多肽产品质量的情况下实现工业化生产。

为实现本发明的目的所采用的技术方案是：一种动物多肽的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)取富含动物蛋白的动物组织及动物骨骼作为原料，进行清洗、粉碎、保鲜处理；

(2)将原料进行蒸煮升温至140℃，然后保温8小时；

(3)原料自然降温至37-50℃后，加入到Tris－缓冲液中，料液比(w/v)为1∶2，加入木瓜蛋白酶或复合酶，进行水解；

(4)水解后，将原料升温至146℃灭酶，干燥处理3小时；

(5)自然降温至50℃进行保温；然后在11000r/min下离心20min，取上清液；

(6)上清液经活性炭吸附后即得动物多肽。

优选的，所述步骤(3)中使用木瓜蛋白酶的水解时间为2-4小时。

优选的，所述步骤(3)使用木瓜蛋白酶水解时的pH值范围为4～6。

优选的，所述步骤(3)使用的木瓜蛋白酶浓度为480～600U/g。

优选的，所述步骤(3)中使用木瓜蛋白酶的水解条件为温度50℃、时间4h、pH5、酶浓度600U/g。

优选的，所述步骤(3)中加入的复合酶优选为等量的中性蛋白酶和胰蛋白酶。优选的，当使用复合酶时，所述步骤(3)中的水解时间优选为1-4小时。

现有技术中有使用酸水解的工艺，虽酸法较酶法水解强度高，但动物组织或骨骼中的灰分、色素易溶于酸，水解后需脱灰、脱色。相对于现有技术，本发明采用酶法水解反应温和，氨基酸破坏小，安全可靠，易控制，无污染，且得到的胶原多肽纯度高，水溶性好，理化性质稳定。

附图说明

图1所示为木瓜蛋白酶水解温度对水解度的影响曲线图；

图2所示为木瓜蛋白酶水解时间对水解度的影响曲线图；

图3所示为木瓜蛋白酶水解pH值对水解度的影响曲线图；

图4所示为木瓜蛋白酶浓度对酶解效果的影响曲线图。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明作进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1：

一种动物多肽的提取方法，包括以下步骤：

(1)取猪内脏及猪骨作为原料，进行清洗、粉碎、保鲜处理；

(2)将原料进行蒸煮升温至140℃，然后保温8小时；

(3)原料自然降温至37-50℃后，加入Tris－缓冲液(0.05mol/L，pH7.5)中，料液比(w/v)为1∶2，加入木瓜蛋白酶，进行水解；