[发明专利]检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的引物、试剂盒及其PCR方法有效
申请号: | 201510290036.2 | 申请日: | 2015-05-29 |
公开(公告)号: | CN104962609B | 公开(公告)日: | 2017-11-28 |
发明(设计)人: | 高劲松;张英杰;魏欣芳;李星颐;刘晓莹;魏潇;魏奇 | 申请(专利权)人: | 沈阳优吉诺生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 110000 辽宁省沈*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 cyp2c9 vkorc1 基因 多态性 引物 试剂盒 及其 pcr 方法 | ||
1.一种检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的引物,其特征在于,所述引物包括:检测CYP2C9基因野生型特异性上游引物、检测CYP2C9基因突变型特异性上游引物和检测CYP2C9基因野生型特异性上游引物与检测CYP2C9基因突变型特异性上游引物共用的第一下游引物;
且所述检测CYP2C9基因野生型特异性上游引物序列如SEQ No.17所示,所述检测CYP2C9基因突变型特异性上游引物序列如SEQ No.14所示,所述第一下游引物序列如SEQ No.16所示;
检测VKORC1基因野生型特异性上游引物、检测VKORC1基因突变型特异性上游引物和检测VKORC1基因野生型特异性上游引物与检测VKORC1基因突变型特异性上游引物共用的第二下游引物;
且所述检测VKORC1基因野生型特异性上游引物序列如SEQ No.38所示,所述检测VKORC1基因突变型特异性上游引物序列如SEQ No.35所示,所述第二下游引物序列如SEQ No.37所示。
2.一种检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂,其特征在于:所述试剂含有权利要求1所述的引物。
3.一种检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒含有权利要求1所述的引物。
4.按照权利要求3所述检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括分别与权利要求1中检测CYP2C9和VKORC1基因引物配合使用的第一探针和第二探针,其中,所述第一探针和所述第二探针均为Taqman探针,且所述第一探针序列如SEQ No.15所示,所述第二探针序列如SEQ No.36所示。
5.按照权利要求4所述检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括PCR反应管、dNTPs和Taq酶混合液、PCR缓冲液、检测管家基因GAPDH的上游引物、检测管家基因GAPDH的下游引物和检测管家基因GAPDH的探针、阳性质控品和空白对照;
所述检测管家基因GAPDH的上游引物序列如SEQ No.19所示;所述检测管家基因GAPDH的下游引物序列如SEQ No.20所示;所述检测管家基因GAPDH的探针序列如SEQ No.21所示。
6.按照权利要求5所述检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的试剂盒,其特征在于:所述检测CYP2C9基因突变型特异性上游引物、所述第一下游引物、所述第一探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物和所述检测管家基因GAPDH的探针被预先包被于C型PCR反应管内;所述检测CYP2C9基因野生型特异性上游引物、所述第一下游引物、所述第一探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物和所述检测管家基因GAPDH的探针被预先包被于A型第一PCR反应管内;所述检测VKORC1基因突变型特异性上游引物、所述第二下游引物、所述第二探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物和所述检测管家基因GAPDH的探针被预先包被于A型第二PCR反应管内;所述检测VKORC1基因野生型特异性上游引物、所述第二下游引物、所述第二探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物和所述检测管家基因GAPDH的探针被预先包被于G型PCR反应管内。
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