[发明专利]消化酶组合物及其应用、脐带上皮细胞的分离培养方法在审
| 申请号： | 201510290339.4 | 申请日： | 2015-05-29 |
| 公开（公告）号： | CN104894088A | 公开（公告）日： | 2015-09-09 |
| 发明（设计）人： | 陈海佳;王一飞;葛啸虎;吴子杰;王小燕;李平 | 申请（专利权）人： | 广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/42 | 分类号： | C12N9/42;C12N9/50;C12N9/94;C12N5/071 |
| 代理公司： | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人： | 赵青朵 |
| 地址： | 510000 广东省广州市国*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 消化酶 组合 及其 应用 脐带 上皮细胞 分离 培养 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种消化酶组合物，其特征在于，包括透明质酸酶、胶原酶Ⅷ和胰酶。
2.根据权利要求1所述的消化酶组合物，其特征在于，所述透明质酸酶、所述胶原酶Ⅷ与所述胰酶的质量比为(5～30)：(1～10)：(1～10)。
3.根据权利要求1所述的消化酶组合物，其特征在于，所述透明质酸酶、所述胶原酶Ⅷ与所述胰酶的质量比为5：1：1。
4.如权利要求1至3中任一项所述消化酶组合物在分离脐带上皮细胞中的应用。
5.一种脐带上皮细胞的分离培养方法，其特征在于，包括如下步骤：
采用如权利要求1至3中任一项所述消化酶组合物对脐带表面外层膜进行消化，将获得脐带上皮细胞进行细胞培养。
6.根据权利要求5所述的分离培养方法，其特征在于，所述细胞培养的培养基为添加EGF的含10％FBS的DMEM/F12培养基。
7.根据权利要求6所述的分离培养方法，其特征在于，所述EGF的质量百分含量为0.01～1％。
8.根据权利要求5所述的分离培养方法，其特征在于，所述细胞培养为在36～38℃、5％CO2条件下培养至融合度80％。
9.根据权利要求5所述的分离培养方法，其特征在于，所述细胞培养的培养基采用明胶包被。
10.根据权利要求5至9中任一项所述的分离培养方法，其特征在于，所述消化的温度为36～38℃，消化的时间为0.5～3h。
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