[发明专利]检测乙醛脱氢酶2基因rs671多态性位点的引物、试剂盒及其PCR方法有效
申请号: | 201510290613.8 | 申请日: | 2015-05-29 |
公开(公告)号: | CN104894256B | 公开(公告)日: | 2018-01-26 |
发明(设计)人: | 高劲松;张英杰;李星颐;樊志美;于农;魏潇;魏奇 | 申请(专利权)人: | 沈阳优吉诺生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 110000 辽宁省沈*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 乙醛 脱氢酶 基因 rs671 多态性 引物 试剂盒 及其 pcr 方法 | ||
1.一种检测乙醛脱氢酶2基因rs671多态性位点的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒含有用于检测乙醛脱氢酶2基因rs671多态性位点的野生型特异性上游引物、突变型特异性上游引物和野生型特异性上游引物与突变型特异性上游引物共用的下游引物以及探针;
且所述野生型特异性上游引物的序列如SEQ No.17所示,所述突变型特异性上游引物的序列如SEQ No.14所示,所述共用的下游引物的序列如SEQ No.16所示;
所述探针为Taqman探针,所述探针的序列如SEQ No.15所示。
2.按照权利要求1所述检测乙醛脱氢酶2基因rs671多态性位点的试剂盒,其特征在于:所述试剂盒还包括PCR反应管、dNTPs和Taq酶混合液、PCR缓冲液、检测管家基因GAPDH的上游引物、检测管家基因GAPDH的下游引物和检测管家基因GAPDH的探针、阳性质控品和空白对照;
所述检测管家基因GAPDH的上游引物序列如SEQ No.19所示;所述检测管家基因GAPDH的下游引物序列如SEQ No.20所示;所述检测管家基因GAPDH的探针序列如SEQ No.21所示。
3.按照权利要求2所述检测乙醛脱氢酶2基因rs671多态性位点的试剂盒,其特征在于:所述突变型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物和所述检测管家基因GAPDH的探针被预先包被于A型PCR反应管内;以及与所述野生型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物和所述检测管家基因GAPDH的探针被预先包被于G型PCR反应管内。
4.按照权利要求3所述检测乙醛脱氢酶2基因rs671多态性位点的试剂盒,其特征在于:所述A型PCR反应管内突变型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物和所述检测管家基因GAPDH的探针浓度分别为50nM-2μm、50nM-2μm、50nM-400nM、1pm-20pm、1pm-20pm、0.05pm-5pm;以及所述G型PCR反应管内野生型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物和所述检测管家基因GAPDH的探针浓度分别为50nM-2μm、50nM-2μm、 50nM-400nM、1pm-20pm、1pm-20pm、0.05pm-5pm。
5.按照权利要求4所述检测乙醛脱氢酶2基因rs671多态性位点的试剂盒,其特征在于:所述A型PCR反应管内突变型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物和所述检测管家基因GAPDH的探针浓度分别为500nM、500nM、100nM、5pm、5pm、2.5pm;以及所述G型PCR反应管内野生型特异性上游引物、所述共用的下游引物、所述探针、所述检测管家基因GAPDH的上游引物、所述检测管家基因GAPDH的下游引物和所述检测管家基因GAPDH的探针浓度分别为500nM、500nM、100nM、5pm、5pm、2.5pm。
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