[发明专利]一种针对高分子纳米材料的透射电镜简易检测方法有效
申请号: | 201510294051.4 | 申请日: | 2015-06-01 |
公开(公告)号: | CN105044133B | 公开(公告)日: | 2018-12-21 |
发明(设计)人: | 梁兴杰;车晶;翁郁华;郭宏博;薛向东;甘雅玲 | 申请(专利权)人: | 国家纳米科学中心 |
主分类号: | G01N23/00 | 分类号: | G01N23/00 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋;侯桂丽 |
地址: | 100190 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 针对 高分子 纳米 材料 透射 简易 检测 方法 | ||
1.一种针对高分子纳米材料的检测方法,包括如下步骤:
1)以两亲性高分子材料和药物为原料,通过溶剂挥发法制备包载药物的高分子纳米胶束,得到胶束水溶液;
2)将步骤1)得到的胶束水溶液稀释后取微量滴加于附有支持膜的铜网上,烘烤,使水分蒸发完全;对样品进行染色,然后用去离子水洗涤,洗涤完成后再次将样品完全烘干得到高分子纳米胶束;
3)将步骤2)制得的高分子纳米胶束电镜样品利用生物透射电子显微镜进行形貌观测,得到粒径小于50nm的高分子胶束透射电镜图像;
步骤1)中所述高分子材料为二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇、聚乳酸-聚乙二醇、聚乳酸-羟基乙酸共聚物-聚乙二醇、聚己内酯-聚乙二醇中的1种或2种以上的混合物;所述药物为氟比洛芬和/或氟比洛芬酯;
步骤1)中溶剂挥发法采用机械搅拌或磁力搅拌;
步骤2)中所述稀释后的胶束水溶液中高分子材料的浓度为0.1~5mg/mL;
步骤3)中生物透射电子显微镜的电压设置为80-120kV。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤1)中所述高分子材料为PEG2000的DSPE-PEG高分子材料。
3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤1)中溶剂挥发法所选溶剂为甲醇、丙酮、四氢呋喃中的一种或两种以上的混合物。
4.根据权利要求3所述的检测方法,其特征在于,步骤1)中溶剂挥发法所选溶剂为三者的混合物。
5.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤1)中溶剂挥发法采用磁力搅拌。
6.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,溶剂挥发法的搅拌速度为每分钟600-1200转,搅拌时间为5-48h。
7.根据权利要求6所述的检测方法,其特征在于,溶剂挥发法的搅拌速度为每分钟800-1000转;搅拌时间为8-12小时。
8.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述稀释后的胶束水溶液中高分子材料的浓度为0.5~1mg/mL。
9.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述支持膜采用FORMVAR膜、普通碳支持膜、纯碳膜或薄纯碳膜。
10.根据权利要求9所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述支持膜采用纯碳膜。
11.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,所述烘烤的温度为25-40℃。
12.根据权利要求11所述的检测方法,其特征在于,所述烘烤的温度为30-35℃。
13.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述染色使用染液试剂。
14.根据权利要求13所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述染色使用1%~5%的醋酸双氧铀水溶液。
15.根据权利要求14所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述染色使用2%的醋酸双氧铀水溶液。
16.根据权利要求13所述的检测方法,其特征在于,所述染色试剂用量为6-10μL。
17.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述染色的方法为将铜网置于染液液滴上或直接滴加染液于铜网。
18.根据权利要求17所述的检测方法,其特征在于,步骤2)中所述染色的方法为直接滴加染液于铜网。
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