[发明专利]人类CYP2C9和VKORC1基因多态性检测试剂盒

权利要求书

1.一种用于CYP2C9和VKORC1基因多态性检测试剂盒，该试剂盒包括PCR缓冲液，dNTP，HotStartTaq酶，UNG酶，2组特异性引物，2组特异性探针和内标系统，其中，所述2组特异性引物序列分别为SEQIDNO:1、SEQIDNO:2与SEQIDNO:3；SEQIDNO:4；SEQIDNO:5与SEQIDNO:6。

2.如权利要求1所述的CYP2C9和VKORC1基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述2组特异性探针序列分别为SEQIDNO:7与SEQIDNO:8，SEQIDNO:9与SEQIDNO:10，且所述特异性探针5’端修饰有FAM或VIC，3’端修饰有NFQ-MGB。

3.如权利要求1或2所述的CYP2C9和VKORC1基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述内标系统包含内标引物和内标探针，所述内标引物序列为SEQIDNO:11和SEQIDNO:12，所述内标探针序列为SEQIDNO:13。

4.如权利要求3所述的CYP2C9和VKORC1基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述内标探针5’端修饰有ROX，3’端修饰有BHQ2。

5.如权利要求1至4任一项所述的CYP2C9和VKORC1基因多态性检测试剂盒，其特征在于，所述检测试剂盒含有阳性对照液和空白对照液，所述阳性对照液含有4种质粒DNA混合液，所述4种质粒DNA分别含有2种不同的CYP2C9等位基因和2种不同的VKORC1等位基因，所述空白对照为Tris-HCl缓冲液。

6.一种用于检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的方法，该方法包括以下步骤：

(1)设计并筛选特异性扩增与检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的引物组合和探针组合；制备如权利要求1至6任选一项所述试剂盒；

(2)获得待测样品基因组DNA；

(3)进行荧光定量PCR扩增：每个样本分两个反应管分别检测CYP2C9和VKORC1基因的多态性，每管中加入特异性引物组和探针组、PCR反应缓冲液、Taq酶、UNG酶、内标系统，将上述获得的基因组DNA先后取相同的量加入所述2个反应管中并同时进行PCR反应。