[发明专利]一种菊芋组培繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及植物组织培养领域，尤其涉及一种菊芋组培繁殖方法。

背景技术

菊芋(Helianthus tuberosus L.)，又称洋姜、鬼子姜、五星草等，是菊科(Compositae)向日葵属的多年生草本植物，原产北美，经欧洲传入我国。菊芋块茎质地细密、脆嫩、可食用或做酱菜，嫩叶是一种营养丰富的青饲料。由于其所具有的独特药用保健功效和诸多的加工用途，被联合国粮农组织称为“21世纪人畜共用作物”，开发前景十分广阔。菊芋性喜清凉干燥的气候，喜光照忌炎热，根系发达，有很强耐旱能力，并且在沙漠治理和水土保持方面体现出良好的生态价值。

菊芋的利用价值主要体现在产量高的块茎上。菊芋块茎肥大，淡黄褐色，肉白色。单个的新鲜块茎重50～70g，含水量79.8％，碳水化合物16.6％，蛋白质1％，脂肪1％，粗纤维0.6％，灰分2.8％，还含有一定量的硫胺素、核黄素、尼克酸和抗坏血酸，所含的微量元素钙、磷、铁等为根茎类蔬菜之最。此外，菊芋还富含菊糖、葡萄糖和多聚戊糖以及维生素C、维生素B1、维生素E、钾、镁和丙氨酸等。菊芋块茎含有丰富菊糖(inulin，又称菊粉)，为多聚果糖，不同于其它植物体内储藏的淀粉——多聚葡萄糖。

近年来，菊芋以其极强的抗逆性，显著的保健效果，广泛的用途得到了越来越多人的关注。菊芋相关的研究也逐渐丰富，目前国内外相关研究已涉及育种、栽培、生理生化、分子生物学及综合利用等多个方面。一般情况下菊芋在大田中的繁殖方式为无性繁殖，块茎长期生长于地下，容易受到多种病毒的侵害，会导致大量病毒病的积累，最终导致品种的劣化和产量的逐年降低。因此建立和完善菊芋组培快繁技术是解决这一问题的重要途径。

发明内容

鉴于此，有必要提供一种能够建立菊芋组培快繁的菊芋组培繁殖方法。

一种菊芋组培繁殖方法，包括如下步骤：

对外植体进行消毒处理；

将所述外植体接种至愈伤组织诱导培养基，在23℃-25℃下，暗培养至出现愈伤组织，其中，所述愈伤组织诱导培养基为添加有0.8mg/L-1.6mg/L 6-苄氨基腺嘌呤和0.2mg/L-0.5mg/L萘乙酸的MS培养基；

取所述愈伤组织，将其切成小块，转接至不定芽诱导培养基中，在23℃-25℃下，光照培养至长出不定芽，其中，所述不定芽诱导培养基为添加有1.0mg/L-2.0mg/L 6-苄氨基腺嘌呤和0.1mg/L-0.3mg/L萘乙酸的MS培养基；

将所述不定芽转移至继代培养基中，在23℃-25℃下，光照培养20-25天，形成继代苗，其中，所述继代培养基为添加有1.5mg/L-2.0mg/L 6-苄氨基腺嘌呤的MS培养基；

将所述继代苗转入生根培养基中，在23℃-25℃下，光照培养15-20天，形成生根的组培苗，其中，所述生根培养基为添加有0.2mg/L-0.6mg/L吲哚丁酸的1/2MS培养基；

取出所述生根的组培苗，洗去所述组培苗的根部的生根培养基，栽入基质中，再移栽至大田。

在其中一个实施例中，所述外植体为菊芋的块茎、茎段或叶片。

在其中一个实施例中，当所述外植体为块茎时，对所述外植体进行消毒处理的方法如下：

将所述块茎采用自来水冲洗，接着采用清洗液浸泡，再用自来水冲洗干净，去皮，切去芽点部分，并用无菌水冲洗，切块后采用0.1％升汞灭菌7min-8min，再采用无菌水冲洗干净。

在其中一个实施例中，当所述外植体为茎段时，对所述外植体进行消毒处理的方法如下：

将所述茎段采用自来水洗净，接着采用无菌水冲洗，切段后采用0.1％升汞灭菌5min-6min，接着采用无菌水冲洗干净。

在其中一个实施例中，当所述外植体为叶片时，对所述外植体进行消毒处理的方法如下：

将所述叶片采用自来水洗净，接着采用无菌水冲洗，然后将所述叶片剪成条状，再采用0.1％升汞灭菌4min-5min，接着采用无菌水冲洗干净。

在其中一个实施例中，所述愈伤组织诱导培养基中还可添加0.1mg/L-0.5mg/L的2,4-二氯苯氧乙酸。

所述继代培养基中还可添加0.1mg/L-0.3mg/L的萘乙酸。

在其中一个实施例中，所述取所述愈伤组织，将其切成小块，转接至不定芽诱导培养基中，在23℃-25℃下，光照培养至长出不定芽的步骤中，光照时间为14h/d-16h/d，光照强度为600lux-1500lux。