[发明专利]一种酶融合表达蛋白及其在虾青素生产方面的应用有效
申请号: | 201510306986.X | 申请日: | 2015-06-05 |
公开(公告)号: | CN104962530B | 公开(公告)日: | 2017-12-12 |
发明(设计)人: | 卢颖洪;刘毅;周敏;戴红林;王宇 | 申请(专利权)人: | 南京理工大学 |
主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/62;C12N15/63;C12P23/00;C12R1/01 |
代理公司: | 南京理工大学专利中心32203 | 代理人: | 邹伟红,朱显国 |
地址: | 210094 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 融合 表达 蛋白 及其 虾青素 生产 方面 应用 | ||
1.一种融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白包括:(1)β-茄红素环化酶;(2)β-胡萝卜素羰基化酶;(3)位于(1) 和(2) 之间的由60 个氨基酸构成的连接肽,其中,编码所述β-茄红素环化酶和β-胡萝卜素羰基化酶的氨基酸序列之间连接有多肽接头的氨基酸序列是SEQ ID NO.3所示的序列。
2.根据权利要求1 所述的融合蛋白,其特征在于,所述β-胡萝卜素羰基化酶的氨基酸序列是SEQ ID NO.1 所示的序列;所述β-茄红素环化酶的氨基酸序列是SEQ ID NO.2 所示的序列。
3.根据权利要求1 所述的融合蛋白,其特征在于,所述融合蛋白的氨基酸序列是SEQ ID NO.4所示的序列。
4.根据权利要求1 所述的融合蛋白,其特征在于,编码所述融合蛋白的核苷酸序列是SEQ ID NO.5 所示的序列。
5.携带编码权利要求1-4 任一所述的融合蛋白的基因的载体。
6.根据权利要求5所述的载体,其特征在于,目标蛋白均带有标记,所述标记分别为His-tag和Strep-tag,标记基因序列分别加到引物的5’端,通过pcr反应使其与目标基因相连,并将目的基因的终止密码子转移到标记基因末端。
7.如权利要求1-4 任一所述的融合蛋白在合成虾青素的应用。
8.根据权利要求7 所述的应用,其特征在于,所述的应用是以β-茄红素为底物,融合蛋白为活性酶,将β-胡萝卜素转化得到角黄素,然后和羟基化酶反应制备得到具有天然构象的虾青素。
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