[发明专利]一种单磷酸阿糖腺苷的制备方法有效
申请号: | 201510313216.8 | 申请日: | 2015-06-10 |
公开(公告)号: | CN105039466B | 公开(公告)日: | 2018-03-27 |
发明(设计)人: | 魏雪纹 | 申请(专利权)人: | 海南卓泰制药有限公司 |
主分类号: | C12P19/32 | 分类号: | C12P19/32 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 570100 海南省海口*** | 国省代码: | 海南;46 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 磷酸 腺苷 制备 方法 | ||
1.一种单磷酸阿糖腺苷的制备方法,其特征在于,以β-D-阿糖腺苷为起始原料,加入反应酶进行酶促合成反应,经过滤、析晶后既得所述单磷酸阿糖腺苷;
其中,具体包括以下步骤:
1)配制反应液:在温度为25℃-45℃的条件下,将ATP.Na2、β-D-阿糖腺苷、甘油、镁离子溶液搅拌得混合液,所述ATP.Na2、β-D-阿糖腺苷、甘油、镁离子溶液的摩尔质量比为1:1-5:10-15:0.05-0.2,在混合液中加入调节PH值至7.5-9.0,加入二硫苏糖醇既得所述反应液;
2)酶促合成反应:在所述反应液中加入反应酶使其浓度为10-5-10-3mmol/L,进行酶促合成反应,加入碱性溶液控制反应液的PH值为7.6-8.6,反应时间为24h-72h,完成酶促合成反应;
3)过滤、析晶:将步骤2)中完成酶促合成反应的反应液冷却至15℃-24℃,过滤得滤液,将所述滤液冷却至-2℃-14℃析晶,再过滤,既得所述单磷酸阿糖腺苷;
其中,在步骤2)中,所述反应酶为肌酸激酶、腺苷激酶的一种。
2.如权利要求1所述的一种单磷酸阿糖腺苷的制备方法,其特征在于,在步骤2)中,反应液的pH值不再变化时取样做HPLC分析,当β-D-阿糖腺苷含量小于3%时,完成酶促合成反应。
3.如权利要求1所述的一种单磷酸阿糖腺苷的制备方法,其特征在于,在步骤1)中,所述镁离子溶液为醋酸镁、硫酸镁、氯化镁的一种。
4.如权利要求1所述的一种单磷酸阿糖腺苷的制备方法,其特征在于,在步骤2)中,在反应时间为24h后,每间隔6h-10h取样做HPLC分析,当β-D-阿糖腺苷含量小于3%时,完成酶促合成反应。
5.如权利要求2所述的一种单磷酸阿糖腺苷的制备方法,其特征在于,在步骤3)中,所述过滤为通过粗蛋白膜过滤。
6.如权利要求2所述的一种单磷酸阿糖腺苷的制备方法,其特征在于,在步骤1)中,所述碱性溶液为氢氧化钠溶液、浓氨水、碳酸氢钠溶液、碳酸钠溶液。
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