[发明专利]一种定向合成化合物CLCN及其在抗肝癌药物中的应用

说明书

技术领域

本发明公开了一种定向合成化合物CLCN，本发明还进一步提供了该化合物在抗肝癌药物中的应用，属于涉及医药合成技术领域。

背景技术

肝癌是指发生于肝脏的恶性肿瘤，包括原发性肝癌和转移性肝癌两种，人们日常说的肝癌指的多是原发性肝癌。肝癌的初期症状并不明显，而晚期患者因癌细胞扩散使其治愈率较低。手术是治疗肝癌的常用方法，但是大部分患者并不适合该方法，而非手术的治疗方式临床上效果也并不理想。近年来，中药复方及天然化合物的抗肿瘤活性成为研究热点，因此，科研工作者期望能够以此为契机找到更加安全有效的抗肝癌特效药物以弥补目前治疗方式的不足。

虫草素(Cordycepin)又称虫草菌素，是冬虫夏草中主要活性成分，也是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗生素，具有抗病毒、免疫调节、清除自由基等多种药理作用。自1997年发现虫草素具有特殊的选择性杀死白血病癌细胞的作用以来，由美国国家癌症研究所波士顿医学中心(BMC)和OXIGEN公司合作，由虫草素制成的治疗白血病的新药已进入第三期临床实验。虫草素的抗肿瘤活性成为药理学中一个极其活跃的研究领域。细胞实验中虫草素通过调控B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2；Bcl-2)、多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly ADP-ribose polymerase；PARP)、细胞色素C(Cytochrome C；Cyto C)以及Caspase家族等相关蛋白，成功诱导人成神经细胞瘤细胞(SK-N-BE(2)-C)、黑色素瘤细胞(SK-MEL-2cells)及乳腺癌细胞(MCF-7)凋亡；此外，抑制丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)活性也是促MCF-7凋亡的主要因素。

甘草素(Liquiritigenin)是一种存在于甘草中的二氢黄酮单体化合物，具有抗炎、保肝等生理活性。关于甘草素抗肿瘤的报道主要源自南京医科大学课题组以及本课题组。甘草素可有效抑制人肝癌细胞(SMMC-7721)以及宫颈癌细胞(Hela)增殖并诱导凋亡。经体内研究发现，甘草素能延长H22荷瘤小鼠的生存时间，并能抑制瘤体增生及诱导肿瘤组织细胞凋亡。南京医科大学近期的研究表明，甘草素通过调控AKT/mTOR-p70S6K信号通路抑制人宫颈癌HeLa细胞血管生成相关因子VEGF和HIF-1α的表达。

发明内容

本发明公开一种定向合成化合物CLCN，是一种以植物单体为原料定向合成的新化合物，具有抗肝癌效果显著、见效快、副作用小等优点。

本发明进一步公开了定向合成化合物CLCN的制备方法，适用于工业化生产。

本发明还提供CLCN在制备抗肝癌药物中的用途，及制备而得的抗肝癌药物。

本发明所述的一种定向合成化合物CLCN，具有以下结构式：

其化学名称为：CLCN；分子式为：C₂₆H₂₅O₅N₅；相对分子量为：487.64。

本发明所述的定向合成化合物CLCN的合成方法，以甘草素和甘草素为原料定向合成，包括以下步骤：

①将2-6mg甘草素溶于3-6mL二氯甲烷溶液中，加入1-2mL四溴化碳，然后在冰浴中缓慢滴加1-2mL三苯基磷的二氯甲烷溶液，反应完毕后将反应液过滤，滤液浓缩后通过硅胶柱层析(石油醚：氯仿-2:3)浓缩结晶得到反应物A。

②以反应物A与KOH作为反应物(原料比为1：1-1：2)，5-10mL四氢呋喃作为溶剂，70-90℃回流温度下搅拌4-8h，反应完毕后冷却至室温，加入对甲基苯磺酰氯反应6h，收集反应液，旋转蒸发除去反应溶剂四氢呋喃，加水溶解后过滤收集滤渣，干燥结晶，得到反应物B。

③以反应物B和虫草素为原料(原料比为1：1-1：1.5)，1等当量的CuI为催化剂，以20mL二甲基甲酰胺溶液或邻二氯苯溶液中任意一种或两种为溶剂，在30-45℃回流温度条件下搅拌6-12h,反应完毕后将全部反应液过滤，滤液浓缩后通过硅胶柱层析(石油醚：氯仿-2:3)浓缩结晶得到反应物C。

④将反应物C与KOH原料(原料比为1：1-1：1.5)，10mL DMSO作为反应物，10mL四氢呋喃作为溶剂，加热回流4-8h,反应完毕后将全部反应液过滤，滤液浓缩后通过硅胶柱层析(石油醚：氯仿-2:3)浓缩结晶得到目标产物CLCN。