[发明专利]用于增加流动通过工艺的容量的方法

说明书

相关申请

这一申请要求于2014年6月16日提交的美国临时申请号62/012,788的权益。将以上申请的全部传授内容通过引用结合在此。

技术领域

本发明涉及用于增加流动通过工艺的容量的方法。

背景技术

用于单克隆抗体(MAb)的纯化或病毒过滤的工业规模应用典型地利用了结合-和-洗脱工艺、和流动通过工艺，例如阴离子交换(AEX)的和疏水相互作用(HIC)的色谱工艺，以去除来自液体样品或进料的宿主细胞蛋白(HCP)和其他杂质。典型地，选择用于这些流动通过工艺的运行条件，这样使得靶蛋白(例如MAb)并不保留在色谱表面，并且其结果是流动通过色谱装置。典型地，选择用于结合-和-洗脱工艺的运行条件，这样使得靶蛋白(例如MAb)保留或结合在色谱表面，并且然后通过洗脱步骤进行回收，其中结合的靶蛋白从色谱表面转移并且被回收。

对于传统AEX色谱树脂，通常必须在使色谱装置上样之前稀释进料，以便将溶液传导性降低至促进杂质的结合的水平。此类进料稀释所需的不方便和时间承诺已经对开发并不需要用于杂质的有效吸附的进料稀释的耐盐功能性提供了推动力。虽然用于传统AEX膜的容量典型地是在约100-200gMAb/mL树脂的范围内，但是用于耐盐膜吸附器的相应容量更大并且范围例如是从约4-7kgMAb/L树脂。然而，对于在工业规模上经济的色谱工艺而言，色谱树脂的容量应优选是约10-15kgMAb/L膜或更大。

因此，当前存在对开发如下方法的需求，该方法用于增加现存色谱树脂和装置的容量至使得流动通过工艺、结合-和-洗脱工艺、以及模拟的流动通过工艺在工业规模上更经济的水平。

发明内容

在一个实施例中，本发明提供了用于从液体样品中的非靶蛋白分离靶蛋白的工艺，包括获得包含靶蛋白和非靶蛋白的液体样品；增加样品中靶蛋白和非靶蛋白的浓度，以产生用于递送至色谱装置的浓缩进料；递送浓缩进料至色谱装置；在色谱装置中，从非靶蛋白分离靶蛋白；以及从色谱装置回收靶蛋白。在一个具体实施例中，靶蛋白是单克隆抗体(MAb)。

在另一个实施例中，本发明涉及用于增加用于靶蛋白的色谱装置的容量的工艺，包括获得包含靶蛋白和非靶蛋白的液体样品；增加样品中靶蛋白和非靶蛋白的浓度，以产生用于递送至色谱装置的浓缩进料；以及递送浓缩进料至色谱装置，其中用于靶蛋白的色谱装置的容量被增加。在一个具体实施例中，靶蛋白是单克隆抗体(MAb)。

附图说明

如在附图中所说明，从本发明的示例性实施例的以下更具体描述内容，以上内容将变得明显，其中贯穿不同的图，相似参考字符是指相同部分。附图不必按比例绘出，而是重点示出本发明的实施例。

图1是示出作为上样体积的函数，对于两个进料流，宿主细胞蛋白(HCP)的穿透的图。与等分部分1相比，等分部分2大约1.5x更浓。

图2是示出作为MAb上样的函数，HCP去除的穿透曲线的图。

图3是描绘按g/L计的进料浓度对比按美元/介质的克数计的分离介质的成本的图。

图4是描绘按g/L计的进料浓度对比按美元/消耗品的克数计的病毒过滤器的成本的图。

具体实施方式

本发明的示例性实施例的描述如下。

在一个实施例中，本发明提供了用于从液体样品中的非靶蛋白分离靶蛋白的工艺。在另一个实施例中，本发明涉及用于增加用于靶蛋白的色谱装置的容量的工艺。这些工艺在此被统称为本发明的工艺。

不希望受任何具体理论约束，认为在递送至色谱装置之前，增加进料样品中的靶蛋白和非靶蛋白这二者的浓度将增加用于靶蛋白的装置的容量。如在此使用，“增加色谱装置的容量”是指增加装置中的每体积的介质的上样质量。优选地，在此描述的工艺可以增加色谱装置的容量至以下范围：至少约10至约15kg靶蛋白/L色谱介质，或更大。

本发明的工艺一般可以包括以下步骤：获得包含靶蛋白和非靶蛋白的液体样品；增加样品中靶蛋白和非靶蛋白的浓度，以产生用于递送至色谱装置的浓缩进料；以及递送浓缩进料至色谱装置。在一些实施例中，本发明的工艺还可以包括以下步骤：在色谱装置中，从非靶蛋白分离靶蛋白，并且从色谱装置回收靶蛋白。