[发明专利]一种渔用海洋微生态制剂及其制备方法在审
申请号: | 201510339159.0 | 申请日: | 2015-06-18 |
公开(公告)号: | CN104894028A | 公开(公告)日: | 2015-09-09 |
发明(设计)人: | 肖潮雄;陈学豪;熊玲芳;陈启春;陈朝文 | 申请(专利权)人: | 诺可信(厦门)生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;A23K1/16;C12R1/25;C12R1/01 |
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地址: | 361000 福建省厦门市思*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 海洋 生态 制剂 及其 制备 方法 | ||
1.一种渔用海洋微生态制剂,其特征在于:包括植物乳杆菌及戊糖片球菌,所述植物乳杆菌及所述戊糖片球菌的菌数比为2:1。
2.一种如权利要求1所述的渔用海洋微生态制剂的制备方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤一、菌种的活化与扩大培养:
一级培养:在超净工作台中取斜面保存单菌落至100ml灭菌MRS培养基中,置于35℃恒温水浴摇床上培养24h;植物乳杆菌和戊糖片球菌各接种4瓶,目的是活化菌种;24h后取菌液涂布MRS平板多个,置于35℃恒温箱内静置培养24h,待菌落长出,置于4℃冰箱保种,待用;
二级培养:在超净工作台中取斜面保存单菌落接种至200ml灭菌MRS中,两种菌各共接种6瓶,置于35℃恒温水浴摇床上培养24h;
三级培养:取培养好的菌液10ml至2000ml灭菌MRS培养基中,置于35℃恒温水浴摇床上培养24h,得到种子液,采用真空干燥法生产植物乳杆菌2kg、戊糖片球菌30kg,菌数均达亿级;
步骤二、发酵培养基的配制:
蛋白胨10g,牛肉浸膏10g,酵母浸膏5g,葡萄糖20g,磷酸氢二钾2g,乙酸钠2g,柠檬酸二钠2g,七水合硫酸镁0.5g,五水硫酸锰0.2g,吐温-801ml,定容至1L;
步骤三、发酵培养:
将所述植物乳杆菌及所述戊糖片球菌按重量配比2:1的混合菌接种于所述发酵培养基,接种量为2%,所述发酵培养基中按C:N为12:1添加葡萄糖和大豆蛋白胨,发酵温度35℃、初始PH为6.5,搅拌为12h搅拌1次,每次搅拌时间为5min,以PH达到4.0以下为发酵终点;
步骤四、过滤出料:
发酵至终点后,对发酵液进行过滤出料,再进行分装,制得本渔用海洋微生态制剂。
3.如权利要求2所述的一种渔用海洋微生态制剂的制备方法,其特征在于:所述混合菌的菌数为10亿/g。
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