[发明专利]检测SCML2的即用型快速酶免疫组织化学试剂盒

权利要求书

1.检测SCML2的即用型快速酶免疫组织化学试剂盒，其特征在于：有盒体，盒体中包括以下容器：

（1）3%H₂O₂去离子水容器；

（2）粉剂型抗原修复液容器；

（3）粉剂型磷酸盐缓冲液容器；

（4）单克隆小鼠抗人SCML2抗体容器；

（5）聚合物增强剂容器；

（6）HRP酶标抗鼠IgG聚合物容器；

（7）二氨基联苯胺容器。

2.根据权利要求1所述的检测SCML2的即用型快速酶免疫组织化学试剂盒，其特征在于：所述盒体中试剂成分包括：

（1）3%H₂O₂去离子水容器中的试剂成分为3%H₂O₂；

（2）粉剂型抗原修复液容器中的试剂成分为粉剂型抗原修复液；

（3）粉剂型磷酸盐缓冲液容器中的试剂成分为粉剂型磷酸盐缓冲液；

（4）单克隆小鼠抗人SCML2抗体容器中的试剂成分为单克隆小鼠抗人SCML2抗体，储存浓度为0.2μg/μl；

（5）聚合物增强剂容器中的试剂成分为聚合物增强剂；

（6）HRP酶标抗鼠IgG聚合物容器中的试剂成分为HRP酶标抗鼠IgG聚合物；

（7）二氨基联苯胺容器中的试剂成分为二氨基联苯胺。

3.根据权利要求1所述的检测SCML2的即用型快速酶免疫组织化学试剂盒，其特征在于：所述使用方法包括以下步骤：

（1）切片和烤片：石蜡包埋组织5μm连续切片，贴于载玻片上，在电热恒温干燥箱内烘片1 h，所述烘片温度为67℃；

（2）脱蜡、水化组织切片：二甲苯5 min×2次→无水乙醇5 min×1次→95%乙醇5 min×1次→80%乙醇5 min→70%乙醇5 min→自来水冲洗片刻→0.01 mol/L PBS冲洗1 min×3次；

（3）阻断内源性过氧化物酶：每张切片滴加1滴3% H₂O₂，室温10 min，0.01 mol/L PBS冲洗3 min×3次；

（4）抗原修复：高压锅内加适量的水置电磁炉上煮沸，将切片浸入装有抗原修复液的瓷缸中，所述抗原修复液的成分为0.01 mol/L柠檬酸缓冲液，所述柠檬酸缓冲液的pH为6.0，放入高压锅内，加热至喷气，维持3 min；取出瓷缸使修复液自然冷却至室温，0.01 mol/L PBS冲洗3 min×3次；

（5）一抗反应：甩去切片上的血清，滴加1：100稀释的单克隆小鼠抗人SCML2抗体，室温孵育2 h；0.01 mol/L PBS冲洗3 min×3次；

（6）滴加聚合物增强剂：擦去多余水分，滴加1滴聚合物增强剂，室温孵育20 min；0.01 mol/L PBS冲洗3 min×3次；

（7）二抗反应：甩去多余水分，滴加1滴HRP酶标抗鼠IgG聚合物，室温孵育30 min，0.01mol/L PBS冲洗3min×3次；

（8）显色：除去PBS液，每张切片滴加1滴新鲜配制的二氨基联苯胺工作液，同时在显微镜下观察控制显色程度，待出现阳性反应，则置流水下冲洗及时终止反应；

（9）衬染：苏木素复染30s～2min，流水冲洗，1%盐酸-乙醇分化，流水冲洗；

（10）脱水：70%乙醇3 min→80%乙醇3 min→95%乙醇3 min→无水乙醇3 min→二甲苯3 min×2次；

（11）封片：中性树脂封固；

（12）显微镜下观察确定SCML2抗原的表达水平和细胞定位情况。