[发明专利]一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法

权利要求书

1.一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法,其特征在于，包括以下步骤：

（1）样品前处理：取螺旋藻固体样品1-5g，置于碾钵中研碎后加提取溶剂，放入磁力搅拌器中搅碎，离心，沉淀后用GF/C滤纸过滤，再次加入提取液，并加入PH调节剂，调节PH至4-4.5，沸水浴，离心,并加入PH调节剂，调节PH至8-8.5，再次离心，以0.22um微孔滤膜过滤取滤液；

（2）微囊毒素储备液的制备：将步骤（1）中的滤液加入HLB柱中进行富集，洗脱，收集洗脱液置于烧瓶中，于旋转蒸发仪上蒸干，再次富集，再次洗脱，并将洗脱液于旋转蒸发仪上蒸干，取蒸干后的样品加入3-5倍体积的甲醇，转入离心管中，加5-10ml纯化水溶解，离心，取上清液以0.22um微孔滤膜过滤除菌后，-20℃保存作为微囊毒素储备液，并分别置于A、B及C三个培养皿中；

（3）取藤黄微球菌与微嗜酸寡养单胞菌的混合菌接种于步骤（2）中的A培养皿中，并取藤黄微球菌接种于B培养皿中，取微嗜酸寡养单胞菌接种于C培养皿中，均于28-30℃培养，取上清液经0.22um滤膜过滤后，进行微囊毒素含量的监测，每隔24h对三个培养皿各取一次样，各取3次样，以0.22um微孔滤膜过滤后，采用微囊毒素检测试剂盒测定微囊毒素的含量。

2.根据权利要求1所述的一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法,其特征在于，步骤（1）中所述的螺旋藻固体样品剂型选自胶囊、片剂或精粉中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法,其特征在于，步骤（1）中所述的提取溶剂的加入量为30-50ml。

4.根据权利要求1所述的一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法,其特征在于，步骤（1）中所述的提取溶剂选自冰醋酸或醇溶液中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述的一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法,其特征在于，步骤（1）中所述的冰醋酸为体积浓度为5-10%的冰醋酸。

6.根据权利要求1所述的一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法,其特征在于，步骤（1）中所述的醇溶液为丁醇、甲醇、水的混合溶液，优选的，所述的丁醇、甲醇和水的体积比为（1-3）：（4-12）：（20-50）。

7.根据权利要求1所述的一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法,其特征在于，步骤（1）中与步骤（2）中所述的离心速度为10000-12000r/min，离心时间为20-30min；步骤（1）中所述的沸水浴的时间为20-30min。

8.根据权利要求1所述的一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法,其特征在于，步骤（1）中所述的PH调节剂选自0.01-0.1mol/L的氢氧化钠溶液、0.05-0.1mol/L的盐酸溶液或0.03-0.08mol/L的氯化铵中的一种或多种。

9.根据权利要求1所述的一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法,其特征在于，步骤（2）中所述的洗脱过程具体为：先用20-30%的甲醇水溶液洗脱，再用90-100%的甲醇水溶液洗脱；再次洗脱过程具体为：先用浓度为10-20%的甲醇水溶液洗脱，再用60-70%的甲醇水溶液洗脱。

10.根据权利要求1所述的一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法,其特征在于，步骤（3）中A培养皿中藤黄微球菌与微嗜酸寡养单胞菌的接种量分别为2-5%，B培养甲中藤黄微球菌接种量为2-5%，C培养皿中微嗜酸寡养单胞菌的接种量为2-5%。