[发明专利]一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法

说明书

技术领域

本发明属于食品检测领域，具体涉及一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法。

背景技术

螺旋藻及小球藻是目前主要的食用藻类，因其含有丰富的维生素、矿物质及蛋白质等人体多种营养成分，其营养价值日益受到保健行业的关注与重视。研究表明，螺旋藻可预防心脑血门疾病、调节血糖、防治便秘、提高人体免疫力、改善食欲，补充营养，防治发育不良、记忆下降、视力减退等，明显改善体能和智力，因此，尤其适合学习、工作过于疲劳，精神压力大、职业应激等主要原因容易造成亚健康状态人群，而女性人群服用，更是可起到美容养颜，防治贫血的效果。藻类保健食品是一种主要由藻类单细胞植物粉为主要成分, 加入少量赋形剂或单纯用藻粉为原料制成的保健食品。目前，此类保健品日益受到国内外广大消费者的青睐。世界卫生组织( WHO)定为“人类 21世纪的最佳保健品” , 1981 年美国食品和药品管理局( FDA) 确认其为“最佳蛋白质来源之一”, 我国卫生部也批准其为“新资源食品”。

而螺旋藻在人工养殖和自然环境中，都可能被有毒蓝藻污染，伴生一类可对人类肝脏发生损害的微囊毒素。微囊毒素是一种单环 7 肽，至 21 世纪初已确定的 MCYSTs 的同分异构体已达 60 多种，是在蓝藻水华污染中出现频率最高、产毒量最大的一类藻类毒素。研究表明，小鼠经腹腔注射LD ₅₀约为25～ 150μg /kg, 经口 LD ₅₀是5000μg/ kg, 它能通过胎盘屏障影响小鼠胎儿发育, 造成胎鼠肝炎和肾受损, 长期低剂量接触微囊毒素可以引起它在人肝脏的蓄积, 最终可以引起肝癌和其它肝脏疾病。因此，当人们长期大量食用含有微囊毒素的藻类保健品后，可对人体造成严重的伤害。因此，如何有效清除混在螺旋藻及其食品中的微囊毒素十分关键。近年来，国内外学者一直致力于螺旋藻中微囊毒素的清除，报道显示，“食酸戴尔福特菌”、“蜡状芽孢杆菌”等菌种也对水体中的微囊毒素有一定的去除作用，但目前，仍无完善的有关现有技术，而且单一的菌株对微囊毒素的降解效果十分有限。微生物协同作用是消除环境中有机污染物一种重要且有效的方法，微嗜酸寡养单胞菌可一定程度降解微囊毒素，本发明提供一种微囊毒素降解的辅助菌即藤黄微球菌，将其与微嗜酸寡养单胞菌一起用于微囊毒素的降解，不仅可有效降低螺旋藻及其食品中的微囊毒素，且可保持降解菌的稳定性，应用价值广阔。

发明内容

本发明的目的是解决现有技术中存在的上述问题，提供一种螺旋藻类食品中微囊毒素的有效去除方法。

本发明的技术方案如下：

一种螺旋藻类食品中微囊毒素的去除方法,包括以下步骤：

（1）样品前处理：取螺旋藻固体样品1-5g，置于碾钵中研碎后加提取溶剂，放入磁力搅拌器中搅碎，离心，沉淀后用GF/C滤纸过滤，再次加入提取液，并加入PH调节剂，调节PH至4-4.5，沸水浴，离心, 并加入PH调节剂，调节PH至8-8.5，再次离心，以0.22um微孔滤膜过滤取滤液；

（2）微囊毒素储备液的制备：将步骤（1）中的滤液加入HLB柱中进行富集，洗脱，收集洗脱液置于烧瓶中，于旋转蒸发仪上蒸干，再次富集，再次洗脱，并将洗脱液于旋转蒸发仪上蒸干，取蒸干后的样品加入3-5倍体积的甲醇，转入离心管中，加5-10ml纯化水溶解，离心，取上清液以0.22um微孔滤膜过滤除菌后，-20℃保存作为微囊毒素储备液，并分别置于A、B及C三个培养皿中；

（3）取藤黄微球菌与微嗜酸寡养单胞菌的混合菌接种于步骤（2）中的A培养皿中，并取藤黄微球菌接种于B培养皿中，取微嗜酸寡养单胞菌接种于C培养皿中，均于28-30℃培养，取上清液经0.22um滤膜过滤后，进行微囊毒素含量的监测，每隔24h对三个培养皿各取一次样，各取3次样，以0.22um微孔滤膜过滤后，采用微囊毒素检测试剂盒测定微囊毒素的含量。

优选的，步骤（1）中所述的螺旋藻固体样品剂型选自胶囊、片剂或精粉中的一种或多种。

优选的，步骤（1）中所述的提取溶剂的加入量为30-50ml。

优选的，步骤（1）中所述的提取溶剂选自冰醋酸或醇溶液中的一种或多种。

优选的，步骤（1）中所述的冰醋酸为体积浓度为5-10%的冰醋酸。

优选的，步骤（1）中所述的醇溶液为丁醇、甲醇、水的混合溶液，优选的，所述的丁醇、甲醇和水的体积比为（1-3）：（4-12）：（20-50）。