[发明专利]温度敏感型载体pBBR1MCS‑2‑Ts3及其应用有效
| 申请号： | 201510340762.0 | 申请日： | 2015-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN104894155B | 公开（公告）日： | 2017-11-03 |
| 发明（设计）人： | 黄建忠;江贤章;周芬;刘洪娇;祁峰;张明亮;陶勇 | 申请（专利权）人： | 福建师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;C12N15/63 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人： | 关畅,任凤华 |
| 地址： | 350117 福建省福州*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 温度 敏感 载体 pbbr1mcs ts3 及其 应用 | ||
1.构建重组载体的方法，是将SEQ ID No.1的第1557-2526位所示的DNA片段替换为目的基因表达盒，并保持SEQ ID No.1的其他核苷酸不变，得到的重组DNA即为所述重组载体；
所述目的基因表达盒编码的蛋白质为将SEQ ID No.2所示的蛋白质进行A3）的改造、保持SEQ ID No.2的其它氨基酸残基均不变得到的蛋白质：所述A3）为将SEQ ID No.2第86位的Arg突变为Cys；
所述目的基因表达盒中启动所述目的基因表达的启动子为将SEQ ID No.1的第1557-1793位所示的DNA分子进行如下C31）和C32）的改造、保持SEQ ID No.1的第1557-1793位核苷酸所示的DNA分子中的其它核苷酸均不变得到的DNA分子：
C31）将SEQ ID No.1第1747位的C突变为T；
C32）将SEQ ID No.1第1776位的T突变为A。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述目的基因表达盒中的目的基因为将SEQ ID No.1的第1794-2456位核苷酸所示的DNA分子进行B3）的改造、保持SEQ ID No.1的第1794-2456位核苷酸所示的DNA分子中的其它核苷酸均不变得到的DNA分子；所述B3）为将SEQ ID No.1第2049位的C突变为T。
3.由权利要求1或2所述方法构建的重组载体。
4.含有权利要求3所述重组载体的重组微生物或重组细胞系。
5.一种蛋白质，其特征在于：所述蛋白质为将SEQ ID No.2所示的蛋白质进行A3）的改造、保持SEQ ID No.2的其它氨基酸残基均不变得到的蛋白质：所述A3）为将SEQ ID No.2第86位的Arg突变为Cys。
6.一种DNA分子，其特征在于：所述DNA分子为将SEQ ID No.1的第1794-2456位核苷酸所示的DNA分子进行B3）的改造、保持SEQ ID No.1的第1794-2456位核苷酸所示的DNA分子中的其它核苷酸均不变得到的DNA分子；所述B3）为将SEQ ID No.1第2049位的C突变为T。
7.权利要求3所述重组载体在作为温度敏感载体中的应用。
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