[发明专利]一种缢蛏活性十肽及其制备方法和应用有效
申请号: | 201510342409.6 | 申请日: | 2015-06-18 |
公开(公告)号: | CN105085619B | 公开(公告)日: | 2020-11-06 |
发明(设计)人: | 黄芳芳;丁国芳;杨最素;余方苗 | 申请(专利权)人: | 浙江海洋学院 |
主分类号: | C07K7/06 | 分类号: | C07K7/06;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/20;A61K38/08;A61P35/00;A23L33/18;A23J1/04;A23J3/04;A23J3/34 |
代理公司: | 宁波诚源专利事务所有限公司 33102 | 代理人: | 袁忠卫;叶桂萍 |
地址: | 316111 浙江省舟*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 活性 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种缢蛏活性十肽,其特征在于该氨基酸序列为:Ile- Asp- Gly- His- Ala -Ala–Gly- Asp-Val- Gly。
2.根据权利要求1所述的缢蛏活性十肽的制备方法,其特征在于包括以下步骤:
(1)新鲜缢蛏去壳取肉,洗净后捣碎,按料液比1:1加水进行组织匀浆,匀浆后调节匀浆液pH值为3备用;
(2)在上述匀浆液中加入胃蛋白酶进行酶解,获得酶解样品,酶解温度为45℃,加酶量为300U/g缢蛏肉,酶解时间为8h,酶解完成后于30~45 ℃、2~8h进行灭酶;
(3)将上述酶解样品过5KD超滤膜进行超滤,收集分子量小于5KD的酶解液进行冷冻干燥;
(4)对步骤(3)中收集的酶解液进行G-25凝胶分离,收集洗脱峰5;
(5)对步骤(4)中收集的洗脱峰5进行反相高效液相色谱纯化,收集各峰组分并进行氨基酸测序,获得所述缢蛏活性十肽。
前述反相高效液相色谱条件为:Zorbax SB-C18色谱柱 4.6×250mm 5um,检测波长280nm/214nm,柱温为20℃,进样量为100ul,梯度洗脱,流速为1.0ml/min,流动相A为0.06%TFA,B为0.05%TFA的乙腈,洗脱程序:0%~0%B 洗脱4分钟,0%~7%B 洗脱25分钟,7%~100%B 洗脱1分钟,100%~100%B 洗脱5分钟。
3.一种如权利要求1所述的缢蛏活性十肽在制备抗肿瘤药物中的应用,其特征在于:所述抗肿瘤为抑制肿瘤细胞的增殖活性,所述肿瘤为人前列腺癌。
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