[发明专利]一种缢蛏活性十肽及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种缢蛏活性十肽，其氨基酸序列为：Ile‑Asp‑Gly‑His‑Ala‑Ala–Gly‑Asp‑Val‑Gly，ESI/MS检测分子量835.7Da；通过以下步骤制得：新鲜缢蛏去壳取肉，缢蛏肉洗净后捣碎，进行组织匀浆，匀浆后调节匀浆液pH值备用；在匀浆液中加入胃蛋白酶进行酶解，将所得酶解样品进行超滤、G‑25凝胶分离反相高效液相色谱纯化，收集洗脱峰组分并进行氨基酸测序，获得缢蛏活性十肽。该缢蛏活性十肽对人前列腺癌PC‑3细胞的最大增殖抑制率可达90％以上，可为抗前列腺癌药物的研究提供理论基础，对进一步研究和开发以缢蛏活性十肽为基础的药物和食品、提高缢蛏活性十肽的经济价值具有重大意义。

技术领域

本发明涉及生物活性肽领域，尤其涉及一种缢蛏活性十肽及其制备方法和应用。

背景技术

海洋贝类资源丰富且富含许多生理活性物质，因而逐渐被广泛研究和应用。缢蛏(Sinonovacula constricta)俗名蛏子，属瓣鳃纲、异齿亚纲、帘蛤目、灯塔蛤科、缢蛏属，在我国沿海均有分布，产量较大，为我国四大养殖贝类之一[安贤惠，李联泰。缢蛏研究现状及发展前景.科学养鱼，2005(1):4-6.]，缢蛏肉味鲜美，营养丰富，富含人体生命活动所需的各种必需氨基酸、不饱和脂肪酸等营养物质[李太武，林叶，苏秀榕，不同群体缢蛏营养成分的多元性分析，食品科学，2008，29(11):548-551；Remacha，Trivino A，Anadon.Reproductive cycle of the razor clam Solen marginat us(Pulteney 1799)in Spain：acomparative study in three different locations，Journal of shellfishresearch，2006，25(3)：869-876；安贤惠，几种缢蛏的营养性和健康性分析评价，海洋湖沼通报，2005(4)：99-103；李太武，林叶，苏秀榕，不同群体缢蛏营养成分的多元性分析[J]，食品科学，2008，29(11)：548-551；林叶，苏秀榕，孙蓓等，不同种群缢蛏氨基酸及脂肪酸比较研究，食品科学，2006，27(12)：675-678]。

缢蛏性寒、可补阴去邪热，治烦闷、冷痢、热痢、妇人产后虚损、虚热等症，具有较高的药用食用价值[蒋忠妙，郑国平，陈木森.舟山群岛海洋药用动物资源及民间应用的调查[J].中国海洋药物，2002，85(1):35.；苏晶，苏明翥编著，水产品药用巧治百病.沈阳：辽宁科学技术出版社，2000，187.]；缢蛏的活性成分还具有较高的研究价值，如雷晓凌等[雷晓凌，吴红棉，范秀萍等，缢蛏糖胺聚糖的提取分离及其体外抗肿瘤活性的初步研究，药物生物技术，2004，11(3)：146-149]，对缢蛏肉的酶解条件进行研究，发现提取得到的糖胺聚糖对体外培养的HL-60细胞均有一定抑制作用，且随着用量增加抑制作用增强。张永娟等[张永娟，郑惠珍，缢蛏多肽的免疫调节及抗氧化作用，时珍国医国药，2011，22(5)：1076-1077]，提取缢蛏多肽能促进小鼠胸腺和脾脏发育及迟发型变态反应的发生，提高小鼠碳廓清能力及血清溶血素水平；PSD还能提高血清SOD、GSH-Px水平，降低血清MDA含量。

活性肽是由两个或两个以上的氨基酸以肽键相连的化合物，在人体内起重要生理作用，发挥生理功能，如：调节体内的水分、电解质平衡；促进伤口愈合；修复细胞、改善细胞代谢，能起到防癌作用等。活性肽一般通过酶解生物活性材料获得，郑惠娜等发现食物蛋白通过蛋白酶酶解方式，可以得到功能多样的活性多肽(《海洋蛋白酶解制备生物活性肽的研究进展》，郑惠娜、章超桦、曹文红，水产科学，2008，27(7)，370)。对于缢蛏，在抗肿瘤方面的研究还很少，特别是利用酶解技术提取多肽在抗肿瘤方面的研究并未见报道。因此对缢蛏酶解多肽进行研究，对进一步研究和开发以缢蛏酶解多肽多基础的功能性食品和药物，提高缢蛏的经济价值具有重大意义。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是针对现有技术而提供一种具有抗肿瘤活性的缢蛏活性十肽。