[发明专利]一种结核分枝杆菌细胞破碎方法在审
申请号: | 201510342940.3 | 申请日: | 2015-06-19 |
公开(公告)号: | CN105004585A | 公开(公告)日: | 2015-10-28 |
发明(设计)人: | 居建华;周进;居金良;李海涛 | 申请(专利权)人: | 靖江市华煜阳光医疗器械有限公司 |
主分类号: | G01N1/28 | 分类号: | G01N1/28 |
代理公司: | 靖江市靖泰专利事务所 32219 | 代理人: | 陆平 |
地址: | 214500 江苏省泰*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 结核 分枝杆菌 细胞 破碎 方法 | ||
1. 一种结核分枝杆菌细胞破碎方法,其特征在于:包括化学破碎法和机械破碎法,所述化学破碎法对痰液采集样本进行前处理,机械破碎法是对已经完成前处理的样本进行细胞破碎。
2.根据权利要求1所述的结核分枝杆菌细胞破碎方法,其特征在于:所述的化学破碎法包括如下步骤:
(1)取脓样、干酪样或脓性粘液样性质的痰液样本;
(2)根据采集痰液样本的粘稠度,向样本中加入l~2倍体积的氢氧化钠溶液,漩涡震荡摇匀1分钟,使样本和氢氧化钠溶液充分混合,去除痰液样本表面的粘蛋白成分,降低样本的粘性,室温下放置15~20分钟:
(3)将痰液样本进行高速离心,弃上层清液,加入生理盐水重新洗涤,洗去样本中的杂质,提取出所需结核分枝杆菌细胞,便于后续的提取和检测。
3.根据权利要求1所述的结核分枝杆菌细胞破碎方法,其特征在于:所述的机械破碎法包括如下步骤:将待测样本放入超声波破碎装置,加入超声介质为水,超声破碎15分钟,借助介质传播的超声能量,破坏结核分技杆菌细胞结构,释放出RNA。
4.根据权利要求1或2所述的结核分枝杆菌细胞破碎法及其装置,其特征在于:所述的化学破碎法使用的氢氧化钠溶液质量百分浓度为1%~10%。
5.根据权利要求l或2所述的结核分枝杆菌细胞破碎法及其装置,其特征在于:所述的机械破碎法超声波破碎装置的超声额定功率为200~350w,频率20~60 KHz,功率调整范围为额定功率的0~100%。
6.根据权利要求l或2所述的结核分枝杆菌细胞破碎法及其装置,其特征在于:超声介质水的温度在55℃以下,优选为常温。
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