[发明专利]分离测定利伐沙班及其杂质的方法及应用

说明书

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及一种同时分离测定利伐沙班及其杂质的方法及应用。

背景技术

利伐沙班(Rivaroxaban，商品名：Xarelto)是德国拜耳制药开发的一种新的口服抗凝药物，主要用于择期髋关节或膝关节置换手术的成年患者，以预防静脉血栓形成。本品具有高度的选择性和竞争性，出血风险低，安全性好。利伐沙班化学名为：5-氯-氮-({(5S)-2-氧-3-[4-(3-氧-4-吗啉基)苯基]-1,3-唑烷-5-基}甲基)-2-噻吩-羧酰胺，分子式为C₁₉H₁₈ClN₃O₅S。利伐沙班结构式为：

通常来说，一种药物杂质总含量应小于1.0％，单个杂质含量应小于0.1％，对于制备利伐沙班过程中产生的杂质或引入的有关物质，不论是在原料药还是制剂中均需要进行严格控制。申请号为CN103558326A的专利公开了一种测定利伐沙班片中利伐沙班含量的方法，在该方法中只能检测产品中利伐沙班的含量，不能达到同时分离及检测利伐沙班及其相关杂质的目的；申请号为WO2012035057的专利公开了一种用液相色谱法分离测定利伐沙班及其相关杂质的方法，检测的杂质为两个相关杂质(结构式参见专利WO2012035057)，其中公开的杂质A与本发明杂质列表中的杂质B结构相同，其余均不同，且在这个专利中，利用高效液相色谱法完全分离利伐沙班的相关杂质需要56分钟。因此到目前为止，还没有公开的方法报道可快速测定同时分离利伐沙班及其10种制剂杂质。因此开发一种快速有效分离分析利伐沙班及其制剂工艺杂质的方法，对于药物的质量控制及降解途径研究都是十分有意义的工作。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种同时分离测定利伐沙班及其杂质的试剂组合物及方法，该方法可快速同时实现利伐沙班及其杂质的分离和检测，精密度和灵敏度高，为利伐沙班原料药和制剂的质量标准的制定及提高有重要的意义。

为实现上述目的，本发明的技术方案为：

用于分离测定利伐沙班及其杂质的试剂组合物，由以下试剂组成：

试剂A：加有酸性离子对试剂的无机盐缓冲体系，所述酸性离子对试剂的浓度为0.2g/L-4.0g/L；

试剂B：有机溶剂；

所述酸性离子对试剂为：1-戊烷磺酸钠、1-己烷磺酸钠、1-庚烷磺酸钠、1-辛烷磺酸钠和1-癸烷磺酸钠中的一种或多种；

所述有机溶剂为乙腈。

优选离子对试剂的浓度为0.4g/L-2.0g/L。

使用液相色谱法分析电离能力比较强的样品时，样品在反相色谱柱上的保留时间很短或者根本不保留，这时要加入相应的离子对试剂，将分析物上的离子进行结合，形成在柱子上有保留的分子，在选择离子对试剂时，要考虑色谱柱的填料和样品的酸碱性，根据本发明中色谱柱的填料和样品的性质，所以选用了上述酸性离子对试剂。

本发明的目的之二在于提供一种分离测定利伐沙班及其杂质的方法，具体包括以下步骤：

1)取利伐沙班溶于乙腈水溶液得样品溶液；

2)配制流动相：

a配制所述试剂A得流动相A；

b所述试剂B做流动相B；

3)将步骤1)所述样品溶液注入分离检测系统中，用步骤2)所述流动相对步骤1)所述样品溶液进行洗脱分离得洗脱液；

4)步骤3)所述洗脱液进入检测器测定。

所述杂质包括工艺杂质和降解杂质，为杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H、杂质I和杂质J的一种或多种，具体名称及结构为：

上述方法能快速同时实现上述杂质的分离和检测，精密度和灵敏度高，可在25分钟内将利伐沙班及其10种制剂杂质A-J完全分离并进行检测，提供了现有技术未能解决的利伐沙班及其相关杂质的分离测定问题，从而确保了利伐沙班及其制剂的质量可控，并最终确定产品的安全有效。

进一步，步骤1)所述乙腈水溶液中：乙腈和水的体积比为25-30:75-70，优选30:70。

所述样品溶液中每1ml含利伐沙班0.05-0.5mg。进样量会影响色谱柱分离效果和分析结果。进样量影响：进样量过大会造成色谱柱超负荷，多组分色谱峰重叠，分离效果差；进样量过少，又会使含量低的组分因检测器灵敏度不够而不出峰。最大允许的进样量应控制在峰高或峰面积与进样量呈线性关系的范围内。