[发明专利]一种核酸与化学药物的复合制剂及其制备方法

说明书

本发明公开一种核酸与化学药物的复合制剂及其制备方法，所述复合制剂为生物大分子药物与小分子化学药物制剂的混合物；所述小分子化学药物制剂为用于炎症治疗的化学药物制剂；所述生物大分子药物为非病毒载体包裹生物大分子药物。所述复合制剂的优势是利用人体安全的生物材料包裹治疗基因制备出生物大分子核酸药物纳米制剂，该制剂避免了单纯依靠化学药物治疗的毒性大与反复发作的缺点，而且能够弥补单纯利用基因治疗所带来的疗效慢的特点；能够在阻止炎症加重的基础上进行根治；通过体外和体内实验证实了我们所设计的阳离子脂质体、多肽和透明质酸核酸载体是良好的基因物质的输送载体；该复合制剂为化学药与生物药进行联合治疗提供了可行的方案。

技术领域

本发明涉及的是一种药物技术领域的药物输送方法，特别是一种核酸与化学药物复合制剂及其制备方法，尤其为一种可用于炎症的生物大分子核酸药物制剂与现有的小分子化学药物联合治疗的复合制剂。

背景技术

炎症，特别是关节炎，在中老年人群中普遍存在，给患者的日常工作生活带来很大不便与痛苦，关节是药物治疗较难达到的靶器官，无论是静脉注射、肌肉注射还是口服用药，关节内达到的药物浓度总是有限，并且这些治疗方法存在一定的副作用。而关节穿剌给药的途径虽然一定程度克服了上述存在的问题，但由于局部注射治疗后药物的半衰期短、反复穿刺关节较容易带来更多的感染机会，使得关节穿刺治疗在广泛使用上存在一定局限性。而新近开展的基因治疗方法，则能克服以上治疗方法的弊端，其主要优势表现在将编码某一抗炎物质的基因通过载体转化到关节滑膜中，达到高效、长期、稳定地表达这一抗炎物质来治疗类风湿关节炎的目的，期望由此而改变目前治疗类风湿关节炎的现状。例如生物大分子核酸药物白介素1受体拮抗剂(interleukin 1 receptor antagonist,IL-1Ra)可以在基因水平上调节白细胞介素-1(IL-1)的表达，从而抑制炎症。

但单独注射带负电荷的核酸药物难以进入细胞，所以需要合适的输送载体来协助核酸药物进入细胞核，从而达到治病的位点。目前非病毒载体由于没有免疫原性等安全隐患而成为研究的热点(Yin H等人，基于基因治疗的非病毒载体，自然-综述-遗传学.2014；15:541-55.)，但由于难以克服的化学毒性和低转染活性却很难能够成为药用载体。因此，目前治疗的主要手段还是采用小分子化学药物通过皮下或肌肉注射完成。而绝大多数化学药物为激素类药物(肖征宇，类风湿性关节炎的药物治疗方法，中国医师进修杂志，第九期，1993年)。大剂量长期注射容易对患者造成比如感染、股骨头坏死、消化道出血、高血压、肥胖等等毒副作用。

为了突破这一技术瓶颈，本发明利用阳离子多肽、经典的无毒脂质体包裹白介素1受体拮抗剂的纳米颗粒与现有的化学药物注射液混合形成混合制剂然后进行关节腔注射。

到目前为止，单纯利用生物材料包裹核酸药物进行治疗的方法仍处于实验阶段。为了能够将该技术运用于实际应用，我们打算结合已经上市的醋酸氢化可的松混悬液注射技术，将优化的包裹IL-Ra pcDNA形成的纳米颗粒与醋酸曲安奈德注射液形成混悬注射液，进行关节腔注射治疗关节炎。由于关节腔注射属于局部给药，相对于系统给药简单的多，如果利用安全高效的多肽与脂质体一起输送核酸药物来尝试采用化学药与生物药一起进行联合治疗的方案治疗关节炎，希望该方法会有更好的应用前景。

发明内容

本发明的目的在于克服现有关节炎症技术中的不足，提供一种核酸与化学药物复合制剂及其制备方法。本发明通过核酸、阳离子多肽(如图1)、阳离子脂质体组装的三元纳米颗粒，以及在此基础上包裹透明质酸的四元纳米颗粒分别与市售的醋酸曲安奈德注射液形成混悬注射液：(1)利用已经申请专利的三元纳米颗粒和四元纳米颗粒；(2)利用市售的醋酸曲安奈德注射液；(3)将(1)和(2)进行混合制备复合制剂。因此，我们与现有的lipopolyplexes(脂质体)相比，不仅避免了聚阳离子的毒性(多肽是人体内源性分子)，而且有效突破了通过PEG化实现体内长效循环的弊端。兼顾到达靶细胞之前的稳定性和进入靶细胞之后的生物响应性。

本发明的目的是通过以下技术方案实现的：