[发明专利]一种靶向肿瘤的双调控重组腺相关病毒包装系统在审
申请号: | 201510364217.5 | 申请日: | 2015-06-25 |
公开(公告)号: | CN105039404A | 公开(公告)日: | 2015-11-11 |
发明(设计)人: | 周勇;温平;申友锋;唐秋月;何燕;刘兰兰;向垚艮;何久香 | 申请(专利权)人: | 重庆高圣生物医药有限责任公司 |
主分类号: | C12N15/863 | 分类号: | C12N15/863 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 400039 重庆市九龙坡区二*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 靶向 肿瘤 调控 重组 相关 病毒 包装 系统 | ||
1.一种靶向肿瘤的双调控重组腺相关病毒包装系统,其特征在于:该包装系统中腺相关病毒增殖必须的辅助腺病毒E1a、E1b、E2a、E4和VARNA基因受端粒逆转录酶(hTERT)启动子的有效控制,包装质粒的Rep基因受己糖激酶II(HKII)启动子的有效控制。
2.根据权利要求1所述的一种靶向肿瘤的双调控重组腺相关病毒包装系统,其特征在于该包装系统由以下质粒构成:
(1)hTERT启动子调控的腺相关病毒辅助质粒Adv-hTERT-Ep-E1a
(2)HKII启动子调控的腺相关病毒包装质粒pHKII-AAV-RC
(3)腺相关病毒表达载体质粒。
3.根据权利要求1或2所述的一种靶向肿瘤的双调控重组腺相关病毒包装系统,其特征在于采用三质粒共转染法转染细胞包装腺相关病毒。
4.根据权利要求3所述的一种靶向肿瘤的双调控重组腺相关病毒包装系统,其特征在于所述的共转染方法是电穿孔法、磷酸钙共沉淀法、脂质体转染法、多种阳离子物质或病毒介导的转染方法。
5.根据权利要求3所述的一种靶向肿瘤的双调控重组腺相关病毒包装系统,其特征在于所述的共转染方法是脂质体转染法。
6.根据权利要求3所述的一种靶向肿瘤的双调控重组腺相关病毒包装系统,其特征在于所述的细胞为HEK293细胞、人肝癌细胞(HepG2)、人肺癌细胞(A549)和支气管气道上皮细胞(NHBEC)中的任意一种。
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