[发明专利]一种检测CPT1B基因突变的引物及试剂盒

权利要求书

1.一种检测CPT1B基因突变的引物，其特征在于，包括扩增CPT1B基因18个编码外显子及外显子/内含子交界区的引物，其引物序列如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.26所示。

2.一种检测CPT1B基因突变的试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含权利要求1所述的检测CPT1B基因突变的引物。

3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，试剂盒中还包括有：用于PCR扩增反应的酶和试剂。

4.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，用于PCR扩增反应的酶和试剂，包括Taq酶、dNTP、10×PCR缓冲液和双蒸水。

5.如权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，试剂盒中还包括用于提取样品DNA的试剂。

6.一种非诊断目的检测检测CPT1B基因的全部编码外显子及外显子/内含子交界区突变的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)提取待测样本DNA；

(2)以样本DNA为模板，用扩增CPT1B基因18个编码外显子及外显子/内含子交界区的引物进行PCR扩增，得到扩增产物；

(3)采用测序引物对扩增产物进行测序扩增，得到测序扩增产物；

(4)对测序扩增产物进行测序，并与数据库中正常的CPT1B基因序列进行比对，从而确定CPT1B基因的突变位点。

7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，PCR扩增的条件为：94℃预变性3min 20s，94℃变性35s，退火35s，特异性扩增引物的退火温度为52℃-59℃，72℃延伸50s，共30个循环；最后72℃延伸5min。

8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(3)中，所述测序引物为PCR扩增引物对中的正向引物。

9.如权利要求6所述的方法，其特征在于，步骤(4)中，测序的方法为Sanger法。