[发明专利]一种检测CPT1B基因突变的引物及试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测CPT1B基因突变的引物、方法和试剂盒。

背景技术

肉毒碱棕榈酰转移酶1B(Carnitine Palmitoyltransferase 1B,CPT1B)位于骨骼肌细胞线粒体外膜上，是脂肪酸氧化的第1个限速酶，能够催化从酰基辅酶A将酰基转移至L-肉毒碱而形成酰基肉毒碱的反应，在长链脂肪酸从细胞浆转运到线粒体进行氧化的过程中起重要作用。CPT1B基因全长10610个核苷酸，定位于22q13.33染色体上，含有18个编码外显子，编码772个氨基酸肽链。CPT-1B基因突变引起CPT-1B功能缺陷，肉碱依赖的转运系统功能将遭到破坏，从肌肉细胞浆转运到线粒体的长链脂肪酸减少，长链脂肪酸不能被氧化，故血清游离脂肪酸增高，肌肉组织中大量脂肪聚集，从而引起一系列生化紊乱。

目前仅发现3种与疾病相关的CPT1B基因突变，主要为错义突变，也包括1种内含子与外显子交界区的剪切点突变。

对于CPT1B基因突变的检测通常为针对某一个突变进行检测，尚未有关于利用多个特异性引物对CPT1B基因多个突变同时进行测定的报道。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种检测CPT1B基因突变的引物和试剂盒。

本发明的另一目的是提供一种非诊断目的检测CPT1B基因的全部编码外显子及外显子/内含子交界区突变的方法。

为实现上述目的，本发明采用下述技术方案：

一种检测CPT1B基因突变的引物，包括扩增CPT1B基因18个编码外显子及外显子/内含子交界区的引物，其引物序列如SEQ ID NO.1-SEQ ID NO.26所示，具体如下：

CPT1B-P1-F：5’–ACGCACGGACAGGAGTGAAC-3’；(SEQ ID NO.1)

CPT1B-P1-R：5’–CTCTCCTGATGCCCTGCTGT-3’；(SEQ ID NO.2)

CPT1B-P2-F：5’–AGGAGCCAGTTCCCAAGACT-3’；(SEQ ID NO.3)

CPT1B-P2-R：5’–TGGCTGCTGTCCTGTATCTG-3’；(SEQ ID NO.4)

CPT1B-P3-F：5’–TTGTCTTAGCCCTACATCCG-3’；(SEQ ID NO.5)

CPT1B-P3-R：5’–GAAACCAACCAGCAACTCC-3’；(SEQ ID NO.6)

CPT1B-P4-F：5’–AGGGTCTCAGGGAGTTGCT-3’；(SEQ ID NO.7)

CPT1B-P4-R：5’–CCACCATGACTTGAGCACC-3’；(SEQ ID NO.8)

CPT1B-P5/6-F：5’–TAAGGGCTTGAGAATAATGG-3’；(SEQ ID NO.9)

CPT1B-P5/6-R：5’–GACAATTCCCTGGTTATGGT-3’；(SEQ ID NO.10)

CPT1B-P7/8-F：5’–AGATTGGTCCTTGGGTCAGC-3’；(SEQ ID NO.11)

CPT1B-P7/8-R：5’–AGCAGGACTCCCTTCACCAT-3’；(SEQ ID NO.12)

CPT1B-P9-F：5’–CTTCCCTGCTTCTGACACTG-3’；(SEQ ID NO.13)

CPT1B-P9-R：5’–CCCGTCAGAGGTAGGTTATG-3’；(SEQ ID NO.14)

CPT1B-P10-F：5’–GCAGCAGGACAGCCAGCATA-3’；(SEQ ID NO.15)

CPT1B-P10-R：5’–TGCGTCAGCCTTCCGACTAG-3’；(SEQ ID NO.16)

CPT1B-P11/12-F：5’–GGGCAACAGAGCAAGATTC-3’；(SEQ ID NO.17)

CPT1B-P11/12-R：5’–GAAGCCAGTTTGGACTCTAC-3’；(SEQ ID NO.18)

CPT1B-P13/14-F：5’–GGCTTCAGGGAGGACAGAG-3’；(SEQ ID NO.19)