[发明专利]AS-PCR法检测抗嘧菌酯柑橘褐斑病菌的引物对和方法在审

专利信息
申请号: 201510364730.4 申请日: 2015-06-25
公开(公告)号: CN104946767A 公开(公告)日: 2015-09-30
发明(设计)人: 符雨诗;李红叶 申请(专利权)人: 浙江大学
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645
代理公司: 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 代理人: 沈自军
地址: 310027 浙*** 国省代码: 浙江;33
权利要求书: 查看更多 说明书: 查看更多
摘要:
搜索关键词: as pcr 检测 抗嘧菌酯 柑橘 褐斑 病菌 引物 方法
【权利要求书】:

1.引物对,包括上游引物和下游引物,其特征在于,上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.一种包含权利要求1所述引物对的AS-PCR法检测试剂盒。

3.如权利要求1所述的引物对在AS-PCR法检测抗嘧菌酯柑橘褐斑病菌中的应用。

4.一种检测抗嘧菌酯柑橘褐斑病菌的方法,包括以下步骤:

(1)提取待测菌株的DNA;

(2)以提取的DNA为模板,利用权利要求1所述的引物对进行AS-PCR扩增;

(3)AS-PCR扩增产物进行凝胶电泳分离,染色;

(4)结果判断:如出现250bp的条带,说明待测菌株为嘧菌酯抗性菌株,否则,说明待测菌株为嘧菌酯敏感菌株。

5.如权利要求4所述的检测抗嘧菌酯柑橘褐斑病菌的方法,其特征在于,AS-PCR的反应体系为:以20μL计,10×PCR buffer 2.0μL,5mmol/L的上下游引物各2.0μL,各浓度为2.5mmol/L的dNTP mixture 2.0μL,5U/μL的Taq酶0.2μL,200ng/μL的模板DNA 1.0μL,ddH2O10.8μL。

6.如权利要求4所述的检测抗嘧菌酯柑橘褐斑病菌的方法,其特征在于,AS-PCR反应条件为:94℃预变性3min,94℃变性40s,65℃退火40s,72℃延伸1min,进行40个循环,最后72℃延伸10min。

下载完整专利技术内容需要扣除积分,VIP会员可以免费下载。

该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息,商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于浙江大学,未经浙江大学许可,擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作,请联系【客服

本文链接:http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201510364730.4/1.html,转载请声明来源钻瓜专利网。

×

专利文献下载

说明:

1、专利原文基于中国国家知识产权局专利说明书;

2、支持发明专利 、实用新型专利、外观设计专利(升级中);

3、专利数据每周两次同步更新,支持Adobe PDF格式;

4、内容包括专利技术的结构示意图流程工艺图技术构造图

5、已全新升级为极速版,下载速度显著提升!欢迎使用!

请您登陆后,进行下载,点击【登陆】 【注册】

关于我们 寻求报道 投稿须知 广告合作 版权声明 网站地图 友情链接 企业标识 联系我们

钻瓜专利网在线咨询

周一至周五 9:00-18:00

咨询在线客服咨询在线客服
tel code back_top