[发明专利]一种海洋来源小单孢菌SCSIO01819、酶制剂溶液及其制备方法和应用有效
申请号: | 201510366099.1 | 申请日: | 2015-06-26 |
公开(公告)号: | CN104894034B | 公开(公告)日: | 2018-01-19 |
发明(设计)人: | 龙丽娟;尹浩;田新朋;齐振雄;尹团;张偲 | 申请(专利权)人: | 中国科学院南海海洋研究所 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N9/20;C12N9/52;C12P21/06;C12R1/30 |
代理公司: | 广州科粤专利商标代理有限公司44001 | 代理人: | 朱聪聪,刘明星 |
地址: | 510301 *** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 海洋 来源 小单孢菌 scsio01819 酶制剂 溶液 及其 制备 方法 应用 | ||
1.海洋来源的小单胞菌(Micromonospora chalcea)SCSIO 01819,保藏编号:CGMCC No.M 9737。
2.权利要求1所述的海洋来源的小单胞菌(Micromonospora chalcea)SCSIO 01819在制备用于珍珠脱脂的酶制剂溶液-1及制备用于鱿鱼内脏蛋白水解的酶制剂溶液-2中的应用。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,所述的用于珍珠脱脂的酶制剂溶液-1,是通过以下方法制备的:
将海洋来源的小单胞菌(Micromonospora chalcea)SCSIO 01819菌种转接到菌种活化培养基中,在28~37℃下培养12~48小时,将活化的菌液加入诱导产酶发酵培养基的容器中,在pH=7.5~8.0、温度28~37℃下培养12~96小时,当发酵液脂肪酶活力达到1000~3000U /mL,蛋白酶活力达到1500~3000U /mL时,停止发酵,将菌液离心除去菌体和残余培养基,上清液经超滤进一步除去残留菌体,即得到用于珍珠脱脂用的SCSIO 01819酶制剂溶液-1;
所述的用于鱿鱼内脏蛋白水解的酶制剂溶液-2,是通过以下方法制备的:
将海洋来源的小单胞菌(Micromonospora chalcea)SCSIO 01819菌种转接到菌种活化培养基中,在28~37℃下培养12~48小时;将活化的菌液加入诱导产酶发酵培养基的容器中,在pH=7.5~8.0、温度28~37℃下培养12~96小时,蛋白酶活力达到2500~3000U /mL时,停止发酵,将菌液离心除去菌体和残余培养基,上清液经超滤进一步除去残留菌体,即得到用于鱿鱼内脏蛋白水解用的SCSIO 01819酶制剂溶液-2。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述的活化培养基,每1L培养基的配方为:酵母提取物4.0g,麦芽提取物10.0g,葡萄糖4.0g,50%陈海水1.0L。
5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在用于珍珠脱脂的酶制剂溶液-1的制备中,所述的诱导产酶发酵培养基,每1L培养基的配方为:玉米粉2.0~4.0g,大豆粉0.5~2.0g,马氏珍珠贝软体部的石油醚浸提物1.0~1.5g,蔗糖0.5~2.0g,30~50%陈海水1L,超滤膜的截流分子量为100~300KDa,所述的马氏珍珠贝软体部石油醚浸提物是干燥软体部经石油醚浸泡提取后,取提取液减压蒸干所得的残留物。
6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在用于鱿鱼内脏蛋白水解的酶制剂溶液-2的制备中,所述的诱导产酶发酵培养基,每1L培养基的配方为:玉米粉2.0~4.0g,大豆粉0.5~2.0g,脱脂鱿鱼内脏浆2.0~4.0g,蔗糖0.5~2.0g,30~50%陈海水1L,超滤膜的截流分子量为100~300KDa,所述的脱脂鱿鱼内脏浆是将鱿鱼内脏匀浆后,加入等体积水搅拌均匀,以石油醚或正己烷萃取三次后,下层液体蒸发掉除去一半水分制得。
7.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述的用于珍珠脱脂的酶制剂溶液-1在珍珠层脂类脱除中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:
(1)、将珍珠原珠与SCSIO 01819酶制剂溶液-1以珠-液比1:2~5比例(m:v)混合,调节pH值到8.5~13.0,温度28~37℃,浸泡脱脂12~24小时,将珍珠从SCSIO 01819酶制剂溶液-1中取出,并用滤纸吸干表面液体;
(2)、将步骤(1)处理所得珍珠用无水乙醇浸泡,珍珠与无水乙醇的比例为1:2~3(m/v),0.5~2小时后取出珍珠用滤纸吸干表面溶剂,重复3次后晾干,脱去珍珠层水分和残留酶制剂,即可脱除珍珠层脂类。
9.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述的用于鱿鱼内脏蛋白水解的酶制剂溶液-2在制备鱿鱼内脏水解蛋白中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,包括以下步骤:
将鱿鱼内脏碎成浆状后与SCSIO 01819酶制剂溶液-2按体积比1~5:1(v:v)混合进行酶解,反应的起始pH值为7.0~13.0,温度为40~50℃,时间10~20小时,酶解物经静置,分为粗脂肪层和水层,除去脂肪层后干燥,即得具有促进水产动物生长和降低死亡率功能的鱿鱼内脏水解蛋白。
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