[发明专利]Sclerotiorin衍生物及其制备方法与作为抗甲型H1N1流感病毒剂的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种Sclerotiorin衍生物及其制备方法与应用，特别是涉及一种对甲型H1N1流感病毒具有极强的抑制活性的Sclerotiorin衍生物及其制备方法与应用。

背景技术

甲型H1N1流感病毒是A型流感病毒，携带有H1N1亚型猪流感病毒毒株，包含有禽流感、猪流感和人流感三种流感病毒的核糖核酸基因片断，同时拥有亚洲猪流感和非洲猪流感病毒特征。自2009年3月18日在墨西哥爆发甲型H1N1流感病毒以来，已经陆续发现感染、死亡病例。因此，寻找安全高效的抗甲型H1N1流感病毒剂成为国际上急需解决的课题。海洋天然产物被认为是新型抗病毒剂的重要来源。海洋微生物由于在实验室中可以大规模发酵，不易破坏自然环境，而成为活性海洋化合物的最重要来源。然而，近年来尚未见到直接从海洋微生物中来源的天然化合物或其衍生物作为抗甲型H1N1流感病毒剂的应用。

(Centers for Disease Control and Prevention.Update：novel influenza A(H1N1)virus infections-worldwide，May 6，2009.MMWR Morb Mortal Wkly Rep.2009，58，453-458；Scalera，N.M.；Mossad，S.B.Postgrad Med.2009，121，43-47；Medina，R.A.；Garcia-Sastre，A.Nat.Rev.Microbiol.2011，9，590-603.)。

发明内容

本发明的目的在于提供一种来源于海洋真菌的Sclerotiorin衍生物的制备方法与作为抗甲型H1N1流感病毒剂的应用，它能满足现有技术的上述需求。菌种保藏信息：保藏单位名称：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所；保藏日期：2014年4月3日；保藏编号：CGMCC No.8994；分类命名：Penicillium sp.。

本发明提供式I化合物或其药学上可接受的盐：

或其药学上可接受的盐。式I中R为本发明提供式I化合物的制备方法，其特征在于先在菌种培养基中对分离自柳珊瑚的内生真菌Penicillium sp.(TA33-1)进行菌种培养，再在发酵培养基中对该真菌进行发酵培养，将所得菌丝体用氯仿-甲醇混合液(1∶1)浸提3次减压浓缩后，用乙酸乙酯萃取3次得粗浸膏；乙酸乙酯相粗浸膏分别进行正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析后，再经HPLC高效液相制备色谱，将所得洗脱液浓缩，得黄色粉末，即为(+)-Sclerotiorin；在溶有(+)-Sclerotiorin的二氯甲烷溶液中，加入有机伯胺和碳酸钾，反应后得到式I化合物。

上述制备方法中菌种培养基优选含有葡萄糖0.1％-5.0％(重量百分比，下同)、酵母膏0.01％-1％、蛋白胨0.01％-1％、琼脂0.1％-3.0％、氯化钠0.05％-5％，其余为水，培养温度优选为0-30℃，培养时间优选为3-15天；发酵培养基优选含有大米1.0％-80.0％(重量百分比，下同)、氯化钠0.05％-5％，其余为水，培养温度优选为0-30℃，培养时间优选为10-60天；所述的正相硅胶柱层析采用的 固定相优选200-300目硅胶，流动相优选体积比为15％-60％的乙酸乙酯-石油醚混合溶剂；所述Sephadex LH-20凝胶柱层析采用的流动相优选体积比为石油醚∶氯仿∶甲醇＝2∶1∶1的混合溶剂；所述HPLC高效液相制备色谱中采用的色谱柱为本领域常规ODS C18柱，优选为Kromasil 10×250mm，5μm，流速优选为1.0-5.0mL/min，流动相优选体积比为50％-80％的甲醇-水混合溶剂；所述的有机伯胺为

本发明从海洋真菌中获得的Sclerotiorin衍生物对甲型H1N1流感病毒具有极强的抑制活性，可用于开发抗甲型H1N1流感病毒剂，应用前景广阔。

本发明的另一实施方案提供式I化合物或其药学上可接受的盐在制备抗甲型H1N1流感病毒剂中的应用。

本发明中术语“药学上可接受的盐”是指非毒性的无机或有机酸和/或碱的加成盐。可参见“Salt selection for basic drugs”，Int.J.Pharm.(1986)，33，201-217。

具体实施方式