[发明专利]定性定量检测大豆脂肪酸组分的气相色谱方法有效
申请号: | 201510369719.7 | 申请日: | 2015-06-29 |
公开(公告)号: | CN105044229B | 公开(公告)日: | 2017-03-08 |
发明(设计)人: | 孙君明;李斌;范胜栩;韩粉霞;闫淑荣;王连铮 | 申请(专利权)人: | 中国农业科学院作物科学研究所 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
代理公司: | 北京海虹嘉诚知识产权代理有限公司11129 | 代理人: | 吴泳历 |
地址: | 100081 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 定性 定量 检测 大豆 脂肪酸 组分 色谱 方法 | ||
1.一种大豆总脂肪酸的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)将大豆粉装入离心管中,加入正己烷,60℃加热浸提,间隔充分摇匀;
(2)加入甲醇钠溶液进行甲酯化,充分摇匀;
(3)加入饱和氯化钠,静置,取上清液。
2.根据权利要求1所述的提取方法,其特征在于,
大豆粉、正己烷、甲醇钠溶液和饱和氯化钠溶液的用量比例如下:
30.0mg大豆粉:1.0mL正己烷:1.0mL甲醇钠:300μL饱和氯化钠,
其中甲醇钠溶液的浓度为0.5mol/L,所述60℃加热浸提的时长为20分钟。
3.一种定性定量检测大豆脂肪酸组分的气相色谱方法,包括如下步骤:
(1)获取五种脂肪酸标准曲线及标准曲线方程:
所述五种脂肪酸标准曲线的横坐标分别为棕榈酸甲酯、硬脂酸甲酯、油酸甲酯、亚油酸甲酯和亚麻酸甲酯标准样品的梯度浓度,
所述五种脂肪酸标准曲线的纵坐标为采用气相色谱法检测梯度浓度的各种标准品所得的对应的色谱峰面积值;
(2)采用权利要求1或2所述的提取方法提取待测样品的总脂肪酸;
(3)对待测样品的总脂肪酸进行气相色谱检测,根据各种标准样品的色谱峰保留时间判断待测样品所形成的色谱峰包括哪些脂肪酸的色谱峰,并根据标准曲线定性定量分析待测样品中棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和亚麻酸的含量。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述五种脂肪酸标准曲线中,所述棕榈酸甲酯和硬脂酸甲酯的浓度梯度范围为0.2-20mg/mL,所述油酸甲酯、亚油酸甲酯和亚麻酸甲酯的浓度梯度范围为0.2-40mg/mL。
5.根据权利要求3所述的方法,所述获取五种脂肪酸标准曲线及曲线方程指采用已经制作好的标准曲线数据,或者进行现场实验和制作。
6.根据权利要求3~5任一所述的方法,其特征在于,所述气相色谱检测的条件为:色谱柱:RTX-Wax30m×0.25mm×0.25μm;自动进样,进样量:lμL;采用分流进样,分流比:40:1;进样口温度:250℃;载气:氮气,54mL·min-1;氢气,40mL·min-1;空气,400mL·min-1;采取程序升温的方式:180℃保持1.5min,以10℃·min-1升到210℃,保持2min,然后以5℃·min-1升到220℃保持5min;检测器:火焰离子检测器,温度为300℃;每个样品检测20min,样品检测之间间隔2min。
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