[发明专利]一株产天冬氨酸脱羧酶的菌株及用于生产丙氨酸的方法

权利要求书

1.一株产L-天冬氨酸α-脱羧酶的菌株，其特征在于其分类名为特基拉芽孢杆菌PanD37（BacillustequilensisPanD37），已于2015年2月2日保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号：CGMCCNo.10506。

2.一种利用权利要求1所述的特基拉芽孢杆菌PanD37生产L-天冬氨酸α-脱羧酶并用于制备β-丙氨酸的方法，其特征在于所述方法包括如下步骤：

1）菌株活化：挑取菌种至固体保藏培养基，划线接种于恒温培养箱30℃培养14-20h；

2）液体种子制备：挑取1环活化菌株接种于装有50ml液体种子培养基的500ml三角瓶中，八层纱布封口，于30℃，160～200r/min摇床振荡培养12～24h，得液体种子；

3）液体发酵：按5～10%接种量向发酵培养基接入液体种子，转速200～700r/min，溶氧控制20～50%，pH7.0～7.5，温度25～37℃，通气培养24～48h，得到L-天冬氨酸α-脱羧酶的发酵液；

4）催化制备β-丙氨酸：将L-天冬氨酸α-脱羧酶的发酵液置于转化罐中，每100mL发酵液投入L-天冬氨酸1~3g，用盐酸调pH至6.0～8.0，温度35～45℃，敞口散气，维持转速在50～100r/min，反应5～10h。

3.根据权利要求2所述的特基拉芽孢杆菌PanD37生产L-天冬氨酸α-脱羧酶并用于制备β-丙氨酸的方法，其特征在于，

所述的固体保藏培养基包括：酵母浸粉5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl5g/L，琼脂20g/L，pH7.0，121℃灭菌20min；

所述的液体种子培养基包括：酵母浸粉5g/L，蛋白胨10g/L，NaCl5g/L，pH7.0，121℃灭菌20min；

所述的发酵培养基包括：葡萄糖20g/L，蛋白胨20g/L，天冬氨酸2g/L，MgSO₄0.2g/L，KH₂PO₄0.5g/L，硫酸铵3g/L，pH7.0，115℃灭菌20min。