[发明专利]一种分离测定重酒石酸卡巴拉汀中杂质含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体而言，涉及一种重酒石酸卡巴拉汀的质量控制方法，尤其涉及重酒石酸卡巴拉汀中N-乙基-N-甲基氨甲酸含量的检测方法。

背景技术

重酒石酸卡巴拉汀是一种氨基甲酸类脑选择性乙酰胆碱酯酶抑制剂，通过延缓功能完整的胆碱能神经元对释放乙酰胆碱的降解和促进胆碱能神经传导，选择性增强脑皮质和海马等部位乙酰胆碱的效应，从而有效治疗轻、中度阿尔茨海默型痴呆症。其化学名为乙基甲基氨甲酸-3-[1(1S)-二甲氨基乙基]苯酯L-酒石酸盐，分子式为C₁₄H₂₂N₂O₂·C₄H₆O₆。结构式为：

N-乙基-N-甲基氨甲酰氯是重酒石酸卡巴拉汀的关键起始物料，在合成该化合物的过程中，它极易水解成N-乙基-N-甲基氨甲酸。而N-乙基-N-甲基氨甲酸可能会由于去除不完全引入到原料药终产品中，因此需对N-乙基-N-甲基氨甲酸加以控制，其结构式为：

对于合成重酒石酸卡巴拉汀中引入的N-乙基-N-甲基氨甲酸，在原料药中需进行质量控制，因此，实现重酒石酸卡巴拉汀与N-乙基-N-甲基氨甲酸的分离，对其合成和质量控制方面具有重要的现实意义。

发明内容

本发明人通过大量实验摸索了一种分离重酒石酸卡巴拉汀中的N-乙基-N-甲基氨甲酸，并测定其化学纯度的方法，保证重酒石酸卡巴拉汀的质量可控。

本发明所述的一种测定重酒石酸卡巴拉汀中的N-乙基-N-甲基氨甲酸含量的方法，是采用亲水作用液相色谱填料（HILIC）的色谱柱，以一定比例的缓冲盐溶液-有机相为流动相；

上述所述的HILIC亲水性色谱柱，选自Merck品牌。

上述所说的有机相来自以下化合物：甲醇、乙腈，优选乙腈。

上述所说的缓冲盐可为甲酸盐或乙酸盐，优选乙酸铵。

本发明所述的分离测定方法，可按照以下方法实现：

1）取重酒石酸卡巴拉汀及N-乙基-N-甲基氨甲酸的样品适量，分别用乙腈溶解样品，配制成每1mL含重酒石酸卡巴拉汀及N-乙基-N-甲基氨甲酸0.1～1.5mg的样品溶液；

2）设置流动相流速为0.5～1.5mL/min；

3）流动相A为5~30mmol/L的乙酸铵溶液；流动相B为乙腈或甲醇；

4）蒸发光检测器所使用的漂移管温度为30~80℃，增益值为5~12；

5）取1）的样品溶液10~50μL注入液相色谱仪，完成重酒石酸卡巴拉汀及N-乙基-N-甲基氨甲酸的分离测定。其中：

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪品牌为岛津：

LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，ELSD-LTⅡ，CTO-10ASvp

色谱柱：HILIC（SeQuantZIC-HILIC，250×4.6mm，5μm）

流动相：20mmol/L乙酸铵-乙腈（20:80）

流速：1.0mL/min

进样体积：10μL

ELSD参数：

漂移管温度：40℃

载气压力：350KPa

Gain值：9。

本发明采用HILIC(250×4.6mm,5μm)色谱柱，能够有效分离重酒石酸卡巴拉汀与N-乙基-N-甲基氨甲酸。本发明解决了重酒石酸卡巴拉汀与N-乙基-N-甲基氨甲酸的分离和含量测定问题，从而确保了重酒石酸卡巴拉汀原料药的质量可控(结果见附图1-5)

附图说明

图1为实施例1时的重酒石酸卡巴拉汀与N-乙基-N-甲基氨甲酸的HPLC图；

图2为实施例1时的重酒石酸卡巴拉汀的HPLC图；

图3为实施例2时的溶剂HPLC图；

图4为实施例2时的重酒石酸卡巴拉汀与N-乙基-N-甲基氨甲酸的HPLC图；

图5为实施例2时的重酒石酸卡巴拉汀的HPLC图；

具体实施方式：

以下实施例用于进一步理解本发明，但不限于本实验的范围。

实施例1

仪器与条件

高效液相色谱仪的型号，无特别要求，本发明采用的色谱仪品牌为岛津：

LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，ELSD-LTⅡ，CTO-10ASvp