[发明专利]一种苹果酸—乳酸细菌及其应用

说明书

一、技术领域：

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种苹果酸—乳酸细菌及其应用。

二、背景技术：

苹果酸—乳酸发酵（MLF）是干红葡萄酒生产必不可少的工序之一，目前，干红葡萄酒生产中进行苹果酸—乳酸发酵通常有两种方法，一是自然触发，二是人工接种乳酸菌，但是迄今国内还不能生产活性乳酸菌于粉，此类发酵剂全部依赖进口。究其原因在于葡萄酒生产要求特殊的环境，大多数能够进行苹果酸—乳酸发酵的细菌很难在其中繁殖代谢。筛选出适合中国葡萄酒生产的苹果酸—乳酸细菌尤为迫切。

三、发明内容：

本发明为了解决上述背景技术中的不足之处，提供一种苹果酸—乳酸细菌及其应用，其筛选出对不良环境抗性强、苹果酸-乳酸酶活力高、酿酒特性好的优良苹果酸—乳酸细菌。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案为：一种苹果酸—乳酸细菌，其特征在于：所述的苹果酸—乳酸细菌为酒酒球菌SD-1b，该菌株已于2014年4月2日保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏号为：CGMCCNO.8988，。

所述的酒酒球菌SD-1b的培养方法为：

1）在固体分离培养基中，在28-30℃和厌氧充氮气条件下培养5-8天，得分离菌株；

2）对步骤1）分离获得的菌株在液体培养基中进行菌种扩大，液体培养25-28℃，静置，在培养菌到对数期末时进行离心收集菌体，离心转速为1000rpm；

所述的固体分离培养基为改良ATB培养基或改良MRS培养基。

所述的改良ATB培养基：ATB培养基+50mg/L放线菌酮+50mg/L万占霉素。

所述的改良MRS培养基：MRS培养基+10%番茄汁+50mg/L放线菌酮+50mg/L万古霉素。

所述的ATB培养基的配方为：ATB培养基配方为：蛋白胨10g，酵母浸出物5g，葡萄糖10g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，盐酸半胱氨酸0.5g，1MHCL或NaOH调pH至4.8。

所述的MRS培养基的配方为：MRS培养基+10%番茄汁+50mg/L放线菌酮+50mg/L万古霉素。

酒酒球菌SD-1b的分离方法为：在上述固体分离培养基即ATB培养基+50mg/L放线菌酮+50mg/L万古霉素或MRS培养基+10%番茄汁+50mg/L放线菌酮+50mg/L万古霉素上，采用涂布分离法对苹果酸-乳酸细菌进行分离，取样量为0.1ml，培养温度为28℃，在厌氧箱中充N₂培养5-7天，充N₂的量应大于厌氧箱内剩余体积的95%。

一种酒酒球菌SD-1b在制备葡萄酒中的应用。

与现有技术相比，本发明具有的优点和效果如下：本发明酒酒球菌SD-1b对葡萄酒环境适应性良好，可用于葡萄酒行业以及相关的食品行业。

四、附图说明：

图1为本发明微生物在干红葡萄酒生产中的应用步骤图。

五、具体实施方式：

一种苹果酸—乳酸细菌，其特征在于：所述的苹果酸—乳酸细菌为酒酒球菌SD-1b，该菌株已于2014年4月2日保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏号为：CGMCCNO.8988。

所述的酒酒球菌SD-1b的培养方法为：

1）在固体分离培养基中，在28-30℃和厌氧充氮气条件下培养5-8天，得分离菌株；

2）对步骤1）分离获得的菌株在液体培养基中进行菌种扩大，液体培养25-28℃，静置，在培养菌到对数期末时进行离心收集菌体，离心转速为1000rpm；

所述的固体分离培养基为改良ATB培养基或改良MRS培养基。

所述的改良ATB培养基：ATB培养基+50mg/L放线菌酮+50mg/L万占霉素。

所述的改良MRS培养基：MRS培养基+10%番茄汁+50mg/L放线菌酮+50mg/L万古霉素。

所述的ATB培养基的配方为：ATB培养基配方为：蛋白胨10g，酵母浸出物5g，葡萄糖10g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.05g，盐酸半胱氨酸0.5g，1MHCL或NaOH调pH至4.8。

所述的MRS培养基的配方为：MRS培养基+10%番茄汁+50mg/L放线菌酮+50mg/L万古霉素。