[发明专利]一种药材中总重金属含量检测的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种药材中总重金属含量检测的方法，具体涉及一种建立荧光探针标记法药材中总重金属含量检测的数学模型的方法和利用模型测定药材中总重金属含量检测的方法，属于中药材质量全检测领域。

背景技术

重金属通常是指比重大于5g·cm^-3的一类金属元素，如铜、镉、金、银、铅、锌、镍、钴、铬和汞等。目前随着城市化工业化进程的加快，环境污染日益加剧，使中药材重金属含量日益增高，中药材品质降低，严重危害人体健康。重金属可以通过空气、水、食物等渠道进入体内，与体内有机成分、蛋白质、核糖、维生素、激素、生物酶等结合成或反应，使其丧失或改变了原来的生理化学功能而产生病变或表现出毒性，从而对人体造成危害。

目前，重金属的检测方法仍以传统的重金属检测方法如紫外分光光度法、电感耦合等离子体质谱法和高效液相色谱法等为主，所用仪器基本为大型仪器。近年来对于特定金属离子的定性或半定量的荧光检测方法有报道，但不能够快速、简便的进行总重金属的定量测定。

发明内容

本发明的目的是提供一种建立药材中总重金属含量检测的模型的方法，同时本发明还提供了一种药材中总重金属含量检测的模型及其检测的方法，本发明能快速测定药材中总重金属含量。

本发明提供的建立药材中总重金属含量检测的模型的方法，包括如下步骤：

1)取已知等梯度浓度的铅离子溶液，与HEPES缓冲溶液和荧光探针溶液混合得混合液，然后分别测定所述混合液的荧光强度值，以所述混合液的荧光强度比值I₄₅₀/I₃₈₀为横坐标，铅离子浓度为纵坐标，绘制出线性标准曲线Ⅰ，得到线性标准曲线Ⅰ的方程；

2)将药材与HEPES缓冲溶液和荧光探针溶液混合反应后，测定反应后体系的荧光强度值，将所述反应后体系的荧光强度比值I₄₅₀/I₃₈₀代入所述线性标准曲线Ⅰ的方程，得到所述药材中金属离子浓度C值；

3)用现有方法测定与步骤2)中所述药材的同一批的药材中总重金属含量，以该药材中总重金属含量为纵坐标，以步骤2)中所述药材中金属离子浓度C值为横坐标，绘制出线性标准曲线Ⅱ，得到线性标准曲线Ⅱ的方程，所述线性标准曲线Ⅰ的方程和所述线性标准曲线Ⅱ的方程即为所述药材中总重金属含量检测的数学模型。

本发明中，步骤1)得到的所述线性标准曲线Ⅰ的方程，需要分别考察其稳定性、精密性和重现性。

上述的方法，所述铅离子溶液为硝酸铅溶液；

所述荧光探针溶液中荧光探针的结构式为式Ⅰ所示。

上述的方法，所述铅离子溶液的浓度可为0～5.0mg/L，具体可为0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5和5.0mg/L，所述铅离子溶液的浓度梯度可为0～1.0mg/L，优选为0.5mg/L；

步骤1)中，所述荧光探针溶液的浓度可为1.6～2mM，优选为1.8mM；

所述HEPES缓冲溶液的浓度为0.75M～1.25M；

所述药材为天麻、丹参、木通、金银花、茯苓、白芥子、栀子、厚朴、青蒿和鹿茸中的至少6种；

步骤2)中，所述荧光探针溶液的浓度可为1.6～2mM，优选为1.8mM；

所述HEPES缓冲溶液(即羟乙基哌嗪乙硫磺酸的缓冲溶液)的浓度可为0.75～1.25M，优选为1.0M。

上述的方法，所述药材、所述荧光探针溶液和所述HEPES缓冲溶液的体积比可为5：3～5：0.5～1.5，优选为5：4：1。

步骤1)和步骤2)中，所述荧光强度值测定的激发波长可为340nm，所述荧光强度值测定的扫描波长可为350～600nm。

本发明中，步骤3)中，所述药材中总重金属含量采用紫外分光光度法测定。

上述的方法，所述药材中总重金属含量检测的数学模型中，所述线性标准曲线Ⅰ的方程如下式Ⅱ所示，

y＝0.1165x+0.5413 式Ⅱ

式Ⅱ中，y为所述混合液的荧光强度比值I₄₅₀/I₃₈₀，x为所述铅离子的浓度；

所述线性标准曲线Ⅱ的方程如下式Ⅲ所示，

z＝1.2335x+28.355 式Ⅲ

式Ⅲ中，x为与步骤2)中所述药材中金属离子浓度C值，z为与步骤2)中所述药材同一批的药材中总重金属离子浓度。

本发明还提供了一种载体，其上记载了上述的方法建立的药材中总重金属含量检测的模型。