[发明专利]一种固载甲基转移酶电极传感器的制备及应用

权利要求书

1.一种固载甲基转移酶电极传感器的制备方法，特征在于，该方法具有以下工艺步骤：

(1)铂电极预处理：将直径为3mm的铂盘电极，对电极、参比电极均使用直径为0.5mm的铂丝依次用1.0μm、0.3μm、0.05μm的Al₂O₃泥浆抛光打磨成镜面，并在超声清洗仪中先后用乙醇、水超声清洗5min，以清洗后的铂盘电极做为工作电极，于1.0mol L^-1的硫酸溶液中以0.1V s^-1的速度从-0.2V到+1.5V电位范围内进行循环伏安扫描至稳定，得到预处理铂电极；

(2)聚3-噻吩乙酸膜电极制备：将含有3-噻吩乙酸的质量百分浓度为35～45％的N-甲基吡咯烷酮溶液通入氮气除氧15～20min，除氧后，加入0.5～1.0mL三氟化硼乙醚作为电解质，将预处理电极放入，采用计时电流法在电压为1.4V，时间为70-90s的条件下合成聚3-噻吩乙酸膜电极，将合成的聚合膜在80℃的真空干燥箱中干燥12小时以除去电极上的溶剂，得到聚3-噻吩乙酸膜电极；

(3)氨基化聚3-噻吩乙酸膜电极制备：在反应器中，按如下组成加入，氯化亚砜：60～75％，N,N-二甲基甲酰胺：5～12％，混合均匀，将聚3-噻吩乙酸膜电极放入，室温反应24～30h，温度升到55～60℃恒温反应4～5h，滴加乙二胺：18～30％，各组分之和为百分之百，再于55～60℃恒温反应2～3h，取出电极，用N,N-二甲基甲酰胺洗涤，于60℃干燥，放入质量百分浓度为12％的戊二醛溶液中，超声50～60min，取出干燥，得到氨基化聚3-噻吩乙酸膜电极；

(4)甲基转移酶固定液的制备：在反应器中，按甲基转移酶与DNA质量比为1：1加入，甲基转移酶与DNA溶解在pH值为7.2的磷酸盐缓冲溶液中，溶液中含甲基转移酶与DNA的浓度都在12～15mg/mL范围内，该溶液为甲基转移酶固定液；

(5)固载甲基转移酶电极传感器的制备方法：取步骤(4)制备的甲基转移酶固定液滴涂到步骤(3)制备的氨基化聚3-噻吩乙酸膜电极上，滴涂的量为22～30μL，在5～8℃干燥，即得固载甲基转移酶电极传感器。

2.根据权利要求1所述的一种固载甲基转移酶电极传感器的制备方法，特征在于，步骤(4)所述的甲基转移酶为EC 2.1.1.3型甲基转移酶。

3.根据权利要求1所述的一种固载甲基转移酶电极传感器的制备方法所制备的固载甲基转移酶电极传感器，特征在于，所制备的固载甲基转移酶电极传感器用于样品中S-腺苷甲硫氨酸的测定。