[发明专利]一种UPLC测定黄芪提取物中黄酮类成分的方法

权利要求书

1.一种采用超高效液相色谱检测黄芪提取物中黄酮类成分的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备：分别取毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素和芒柄花苷对照品，加50～80％的甲醇配制成每毫升含毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素和芒柄花苷分别为0.01mg、0.04mg、0.004mg和0.15mg的溶液；

(2)供试品溶液的制备：取黄芪提取物0.5克，用70％的甲醇超声提取，提取液定容至25毫升；

(3)测定法：取各对照品溶液和供试品溶液各1-3μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，外标法计算毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素和芒柄花苷的含量；

其中色谱条件如下：

色谱柱：HSS T3

流动相：流动相A相为0.2％甲酸水溶液，B相为乙腈；

流速：0.3-0.6mL/min；

检测波长：205-280nm；

流动相梯度洗脱过程如下：

2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，流动相速度为0.4mL/min。

3.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，检测波长为254nm。

4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)对照品溶液的制备：分别取毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素和芒柄花苷对照品适量，加70％甲醇配制成每毫升含毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素和芒柄花苷分别为0.01mg、0.04mg、0.004mg和0.15mg的溶液；

(2)供试品溶液的制备：取黄芪浸膏0.5克，加70％甲醇溶液适量，超声溶解，定容至25毫升；

(3)测定法：取各对照品溶液和供试品溶液各2μl，注入液相色谱仪，记录峰面积，外标法计算含量，色谱条件为：色谱柱HSS T3，流动相A为含0.2％甲酸的水，流动相B为乙腈，流速为0.4mL/min，检测波长为254nm，流动相梯度洗脱过程如下：

5.如权利要求1-4任一项所述的检测方法，其特征在于，黄芪提取物的制备方法为：

黄芪饮片加水回流提取两次，提取液合并，浓缩，进行两次醇沉，回收乙醇至密度约为1.3mg/ml的浸膏，既得。