[发明专利]抑制STAT3表达和防治慢性移植物抗宿主病的shRNA及应用

权利要求书

1.一种抑制STAT3基因表达和防治慢性移植物抗宿主病的shRNA，其特征在于：所述shRNA的正义链的核苷酸序列如序列表1所示，其反义链的核苷酸序列如序列表2所示。

2.用于防治慢性移植物抗宿主病的药物，其特征在于，含有权利要求1所述的shRNA作为药物的活性成分。

3.根据权利要求2所述的用于防治慢性移植物抗宿主病的药物，其特征在于：所述的用于防治慢性移植物抗宿主病的药物是通过慢病毒载体感染宿主细胞将shRNA药物整合至目的基因组，从而抑制STAT3基因表达和防治慢性移植物抗宿主病。

4.根据权利要求2所述的用于防治慢性移植物抗宿主病的药物，其特征在于所述的用于防治慢性移植物抗宿主病的药物制取步骤包括：

(1)针对STAT3基因序列，设计并筛选出RNA干扰序列；

(2)合成含有RNA干扰序列的单链DNA oligo，然后退火配对产生双链shRNA；

(3)将合成的双链shRNA，通过其两端所含酶切位点直接连入酶切后的慢病毒载体上；

(4)制备重组慢病毒质粒的两种辅助包装原件载体质粒，三种载体质粒分别进行高纯度无内毒素抽提，共转染293T细胞，收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，浓缩后得到高滴度的STAT3-shRNA慢病毒浓缩液。