[发明专利]一种同种异体骨骨粉及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种同种异体骨骨粉的制备方法，所述方法包括以下步骤：

获取同种异体硬骨或软骨；

将同种异体硬骨或软骨与液氮共同加入粉碎机中粉碎；

将粉碎后的同种异体硬骨或软骨的骨片或骨颗粒用蒸馏水漂洗，离心后弃掉上层液体；

将所述骨片或骨颗粒与核酸酶在25℃-60℃进行酶促反应孵育2-96小时；

酶促反应结束后，用蒸馏水漂洗并离心，弃上清液，重复2-3次；

将洗净后的骨片或骨颗粒与洗涤剂和螯合剂的混合溶液在0℃-42℃下洗涤孵育6-96小时；

在孵育结束后，用蒸馏水漂洗并离心，弃上清液，重复2-3次；

将洗净后的骨片或骨颗粒与螯合剂反应12-168小时；

用蒸馏水漂洗并离心，弃上清液，重复2-3次；

将洗净后的骨片或骨颗粒在20-100℃烘干；

使用组织粉碎机将烘干后的骨片或骨颗粒磨成粒径为30-100微米的同种异体骨骨粉，以使所制得的同种异体骨骨粉以氧化钙的形式的钙含量小于30％。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述核酸酶选自脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶中的一种或更多种。

3.如权利要求1所述的方法，其中，所述酶促反应在37℃的温度下进行。

4.如权利要求1所述的方法，其中，所述洗涤剂包括表面活性剂，所述表面活性剂选自聚乙二醇辛基苯基醚、十二烷基硫酸钠、月桂基磺化琥珀酸单酯二钠、椰油酸二乙醇酰胺、三乙醇胺皂、硫酸化蓖麻油、二辛基琥珀酸磺酸钠、十二烷基苯磺酸钠、以及甘胆酸钠中的一种或更多种。

5.如权利要求1所述的方法，其中所述螯合剂选自二氨基乙烷四乙酸、氨基三乙酸、二亚乙基三胺五乙酸、乙二胺四乙酸二钠盐、羟乙基乙二胺三乙酸、二羟乙基甘氨酸、柠檬酸、酒石酸、葡萄糖酸、聚丙烯酸、聚甲基丙烯酸、水解聚马来酸酐、以及富马酸中的一种或更多种。

6.如权利要求1所述的方法，其中，所述同种异体骨来源于捐献骨组织、废弃骨组织以及市售同种骨组织中的一种或更多种。

7.一种凝胶组合物，包括如权利要求1-6任一项所述方法制得的同种异体骨骨粉、水溶性生物材料粉末、赋形剂以及水。

8.如权利要求7所述的凝胶组合物，其中，所述同种异体骨骨粉、所述水溶性生物材料粉末、所述赋形剂以及所述水的用量为：基于每100重量份的水，所述同种异体骨骨粉为1-50重量份，所述水溶性生物材料粉末为1-100重量份，所述赋形剂为0.01-40重量份。

9.如权利要求7或8所述的凝胶组合物，其中，所述水溶性生物材料粉末是水溶性的且具有黏稠度的材料粉末，其包括促进细胞分化的材料粉末。

10.如权利要求9所述的凝胶组合物，其中，所述促进细胞分化的材料粉末选自羟基磷灰石、海藻酸钠、透明质酸、糖胺聚糖、羧甲基纤维素钠、羟乙基纤维素钠、羟丙基纤维素钠、I型胶原、泊洛沙姆、卵磷脂壳聚糖及其衍生物、壳聚糖盐酸盐、羧甲基壳聚糖、以及壳聚糖硫酸酯中的一种或更多种。

11.如权利要求7或8所述的凝胶组合物，其中所述赋形剂选自聚乙二醇双丙烯酸酯、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯、2-羟基-4'-(2-羟乙氧基)-2-甲基苯丙酮、2-羟基-2-甲基-1-苯基丙酮、樟脑醌、杂蒽酮衍生物、二苯甲酮衍生物、苯偶酰衍生物、羟基苯基酮衍生物、硫代硫酸烷基酯盐、稠环芳烃衍生物、聚硅烷衍生物、酰基膦酸盐类化合物、偶氮型光引发剂、金属配合物、氯化钙、泊洛沙姆、二羟苯丙氨酸及丝素蛋白中的一种或更多种。

12.一种同种异体骨生物凝胶材料的制备方法，包括：根据如权利要求1-6任一项所述方法制备同种异体骨骨粉，将所述同种异体骨骨粉、水溶性生物材料粉末以及赋形剂混匀，并与水配制为凝胶，进行交联，得到同种异体骨生物凝胶材料。