[发明专利]类芽孢杆菌CGMCC No.8333凝乳酶及制备方法在审
申请号: | 201510409230.8 | 申请日: | 2015-07-13 |
公开(公告)号: | CN104911167A | 公开(公告)日: | 2015-09-16 |
发明(设计)人: | 杭锋;王钦博;刘振民;陈卫;穆海波;王国骄;刘沛毅;洪青;雍靖怡;齐晓彦 | 申请(专利权)人: | 光明乳业股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/52 | 分类号: | C12N9/52;C12R1/01 |
代理公司: | 上海弼兴律师事务所 31283 | 代理人: | 朱水平;沈利 |
地址: | 201103 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 芽孢 杆菌 cgmcc no 8333 凝乳 制备 方法 | ||
1.一种利用类芽孢杆菌(Paenibacillus damxungensis sp.nov.)CGMCC No.8333的发酵液制备凝乳酶的方法,其特征在于,其包括以下的步骤:
(1)将保藏编号为CGMCC No.8333的类芽孢杆菌的发酵液离心得发酵上清液;
(2)将步骤(1)所得发酵上清液与硫酸铵混合得混合液,所述混合液中硫酸铵的饱和度为50~75%,2~6℃静置混合液0~5小时,离心收集沉淀物;
(3)将步骤(2)所得沉淀物溶解,离心,取上清液,即得凝乳酶。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述静置的时间为0~2小时。
3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述静置的温度为2~4℃。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述混合液中硫酸铵的饱和度为50~60%。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述的发酵液是由包括以下的步骤制备而得的:将保藏编号为CGMCC No.8333的类芽孢杆菌的种子液接种于麸皮培养基发酵培养得发酵液;所述的麸皮培养基包括麸皮和水,所述麸皮的含量为1%~5%,所述百分比为质量百分比;和/或,所述麸皮为小麦麸皮。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤(1)所述发酵培养的时间为48~72小时;所述发酵培养的温度为28~30℃;所述的种子液的接种量为2~4%,所述百分比为体积百分比;和/或,所述发酵培养的方式为震荡培养,所述震荡培养的速度为180~300r/min。
7.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的种子液是由包括以下的步骤制备而得的:将保藏编号为CGMCC No.8333的类芽孢杆菌接种于种子培养基种子培养得种子液;所述的种子培养基为TYC培养基;所述种子培养的时间为20小时;和/或,所述种子培养的温度为28~30℃。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)所述溶解的溶剂为水或PBS溶液;和/或,还包括将将步骤(3)所述上清液冻干的步骤。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,所述溶解的溶剂为0.02mol/L、pH 7.0的PBS溶液。
10.一种由权利要求1~9任一项所述的方法制得的凝乳酶。
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