[发明专利]一种拟南芥ZFN3蛋白多克隆抗体及其制备方法有效
| 申请号： | 201510409322.6 | 申请日： | 2015-07-13 |
| 公开（公告）号： | CN105017417B | 公开（公告）日： | 2018-05-29 |
| 发明（设计）人： | 晁跃辉;韩烈保;肖国增;滕珂;郭涛 | 申请（专利权）人： | 北京林业大学 |
| 主分类号： | C07K16/16 | 分类号： | C07K16/16;G01N33/53 |
| 代理公司： | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人： | 王文君 |
| 地址： | 100083 北京市*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 拟南芥 蛋白 多克隆抗体 制备 重组表达载体 重组蛋白抗原 大肠杆菌感受态细胞 核苷酸序列 特异性识别 蛋白功能 蛋白抗体 功能鉴定 免疫动物 血清分离 检测 构建 转化 研究 | ||
【权利要求书】：
1.一种拟南芥ZFN3蛋白多克隆抗体的制备方法，该方法包括以下步骤：
(1)构建含有如SEQ ID No.3所示核苷酸序列的重组表达载体，将所述重组表达载体转化大肠杆菌感受态细胞获得重组蛋白抗原；
(2)将所述重组蛋白抗原免疫动物，经血清分离纯化获得拟南芥ZFN3蛋白多克隆抗体。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述重组表达载体是将SEQ ID No.3所示的核苷酸序列克隆至原核表达载体获得的。
3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述原核表达载体为pE-SUMOpro。
4.根据权利要求1-3任意一项所述的制备方法，其特征在于，所述重组蛋白抗原的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示。
5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，大肠杆菌感受态细胞为大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。
6.根据权利要求1、2、3、5中任意一项所述的制备方法，其特征在于，免疫动物的步骤包括4次免疫，首先将重组蛋白抗原与完全弗氏佐剂混合后第1次免疫动物，而后将重组蛋白抗原与非完全弗氏佐剂混合后进行第2-4次免疫，每次免疫的时间间隔为14天。
7.利用权利要求1-6中任意一项所述的方法制备的拟南芥ZFN3蛋白多克隆抗体。
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