[发明专利]一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法

权利要求书

1.一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，具体步骤如下：

(1)原料预处理：将新鲜或冷冻的小叶女贞果皮和果肉打浆，制得果浆；

(2)浸提液制备：向果浆中加入质量分数60％～80％的酸化的乙醇溶液，果浆与酸化的乙醇溶液的质量比为1：5～8，进行提取，提取后将浸提液与果渣分离；再向所得的果渣中加入质量分数60％～80％的酸化的乙醇溶液，果渣与酸化的乙醇溶液的质量比为1：5～8，进行提取，提取后将浸提液与果渣分离；合并两次浸提液；每次提取的温度为25～40℃，提取时间的为10～15小时；

(3)粗提液制备：将步骤(2)得到的浸提液在温度45～55℃、真空度在-0.08～-0.1MPa条件下进行减压浓缩，减压浓缩比为5～10，回收乙醇，得小叶女贞果花青素粗提液；

(4)花青素萃取液制备：将步骤(3)得到的小叶女贞果花青素粗提液与乙酸乙脂按体积比1：1～3混合，充分振荡混匀后进行第一次萃取，收集下层水溶液；再将下层水溶液与乙酸乙脂按体积比1：1～3混合，充分振荡混匀后进行第二次萃取，收集下层水溶液；每次萃取时间为2～4小时，萃取温度为25～30℃，萃取次数为2～4次，最后得花青素萃取液；通过萃取除去黄酮类、脂溶性的蛋白、多糖、色素等杂质；

(5)大孔树脂柱纯化：将步骤(4)中制得的小叶女贞果花青素萃取液加入到预处理后的大孔树脂柱内，除去糖类、蛋白类、弱极性的黄酮类，上样量为树脂体积的1/6～1/8；再用含0.001wt％～0.01wt％HCl的去离子水以0.5～1BV/h的流速洗脱柱子，用Molish反应不断检测流出液，直至还原糖全部洗脱出去为止；然后用酸化的质量分数25％～35％乙醇溶液以2～3BV/h的流速洗脱柱子，柱温保持在15～20℃，收集洗脱液，将洗脱液在温度45～55℃、真空度在-0.08～-0.1MPa条件下减压浓缩，减压浓缩比是5～10，回收乙醇，真空冷冻干燥，制得纯度在30％～40％的小叶女贞果花青素。

2.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述的酸化的乙醇溶液为含有0.01％～0.1％盐酸或乙酸的乙醇溶液。

3.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述的分离可采用板框过滤器或浆渣分离机。

4.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(2)所述的减压可采用浓缩罐或旋转蒸发仪。

5.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(5)所述的酸化的乙醇溶液为含有0.001％～0.01％盐酸或乙酸的乙醇溶液。

6.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(5)中所述大孔树脂柱的预处理是用95％乙醇浸泡10-24h，再用95％乙醇洗至洗脱液加入水中不显浑浊，然后用水洗至无醇，上样。

7.如权利要求1所述的一种纯天然小叶女贞果花青素的制备方法，其特征在于：步骤(5)中所述的大孔树脂柱为Amberlite XAD-7HP或AB-8，所用柱子的径高比为1:10～1:15。