[发明专利]高效液相色谱测定头孢呋辛酯片中杂质含量的方法

权利要求书

1.高效液相色谱测定头孢呋辛酯片中有关物质含量的方法，其特征在于，它包括如下步骤：

(1) 杂质储备液的制备：取头孢呋辛酯、杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E用甲醇分别溶解并稀释成每1mL分别约含头孢呋辛酯0.250mg、杂质A 0.50mg、杂质B 0.37mg、杂质C  0.12mg、杂质D  0.12mg、杂质E  0.12mg的溶液；

(2) 杂质测试溶液的制备：分别取上述各杂质储备液1ml至100ml量瓶中用流动相定容至刻度摇匀，即得；

(3)供试品溶液的制备：精密称取头孢呋辛酯片细粉适量，用甲醇溶解后加流动相定容至刻度，制成每1mL约含头孢呋辛酯0.250mg 的溶液；

(4)对照品溶液的制备：精密量取供试品溶液1ml，置100ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀；

(5)空白溶液的制备：甲醇；

(6)测定：高效液相色谱仪以固定相为十八烷基键合硅胶色谱柱，流动相为0.1～0.2mol/L磷酸二氢铵溶液:甲醇=60:40～64:36；

柱温为25℃～35℃，检测波长为278～280nm分别吸取对照品溶液与供试品溶液各15～25μl，注入高效液相色谱仪，读取数据；

(7)计算各杂质溶液浓度的值与相应峰面积值的线性回归方程，相关系数而应不小于0.99，对照品溶液峰形对称，理论塔板数2000以上，杂质测试溶液色谱图中各杂质分离度应不小于1.5，空白溶液色谱图，无与杂质测试溶液色谱图相同的峰出现，即空白溶液无干扰；

(8)每克头孢呋辛酯片中杂质A 不得大于2.0%、杂质B 不得大于1.5%、其他单个杂质不得大于1.0%。

2.权利要求1所述的方法，高效液相色谱仪以固定相为十八烷基键合硅胶色谱柱，流动相为0.2mol/L磷酸二氢铵溶液:甲醇=62:38，柱温为30℃，检测波长为278nm分别吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入高效液相色谱仪，读取数据。

3.权利要求1所述的方法，高效液相色谱仪以固定相为十八烷基键合硅胶色谱柱，流动相为0.1mol/L磷酸二氢铵溶液:甲醇=60:40，柱温为25℃，检测波长为278nm分别吸取对照品溶液与供试品溶液各15μl，注入高效液相色谱仪，读取数据。

4.权利要求1所述的方法，高效液相色谱仪以固定相为十八烷基键合硅胶色谱柱，流动相0.2mol/L磷酸二氢铵溶液:甲醇=64:36，柱温为35℃，检测波长为280nm分别吸取对照品溶液与供试品溶液各25μl，注入高效液相色谱仪，读取数据。