[发明专利]一种人Annexin V基因优化序列及其制作方法和应用有效
申请号: | 201510415724.7 | 申请日: | 2015-07-15 |
公开(公告)号: | CN104911189B | 公开(公告)日: | 2016-10-12 |
发明(设计)人: | 杨艳梅 | 申请(专利权)人: | 北京四正柏生物科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/12 | 分类号: | C12N15/12;C12N15/70;C12N1/21;C07K14/47;G01N15/14 |
代理公司: | 北京市科名专利代理事务所(特殊普通合伙) 11468 | 代理人: | 陈朝阳 |
地址: | 100176 北京市大兴区经济技*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 annexin 基因 优化 序列 及其 制作方法 应用 | ||
1.一种人Annexin V基因优化序列,其特征在于,人Annexin V基因优化序列的核苷酸序列为SEQ ID NO: 1。
2.一种人Annexin V基因优化序列的制作方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一)在基因数据库中获取人Annexin V基因;
步骤二)基因优化:对人Annexin V基因的编码区进行大肠杆菌密码子偏爱性的基因优化得到优化序列;优化序列编码的氨基酸与人Annexin V基因编码形成的氨基酸序列一致;
步骤三)添加酶切位点:在优化序列的5′端添加一种内切酶的酶切位点,在优化序列的3′端添加另一种内切酶酶切位点,得到合成序列;
步骤四)基因合成:对得到的合成序列进行全基因合成。
3.如权利要求2所述的人Annexin V基因优化序列的制作方法,其特征在于,所述步骤三)中,优化序列的5′端添加NdeI酶切位点,优化序列的3′端添加XhoI酶切位点。
4.如权利要求2所述的人Annexin V基因优化序列的制作方法,其特征在于,所述步骤二)中的优化序列为SEQ ID NO: 1。
5.一种含有SEQ ID NO: 1序列的质粒。
6.如权利要求5所述的含有SEQ ID NO: 1序列的质粒,其特征在于,所述质粒为pET23a质粒 。
7.如权利要求6所述的含有SEQ ID NO: 1序列的质粒,其特征在于,SEQ ID NO: 1序列插入到pET23a质粒的NdeI酶切位点和XhoI酶切位点之间。
8.一种含有SEQ ID NO: 1序列的原核生物。
9.如权利要求8所述的含有SEQ ID NO: 1序列的原核生物,其特征在于,所述原核生物为大肠杆菌。
10.一种如权利要求1所述的人Annexin V基因优化序列的使用方法,其特征在于,SEQ ID NO: 1序列导入大肠杆菌中翻译为重组蛋白,所述重组蛋白用于检测细胞凋亡。
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