[发明专利]EB病毒编码的microRNA BART10反义寡核苷酸的应用方法

权利要求书

1.EB病毒编码的microRNA BART10反义寡核苷酸的应用方法，其特征在于，用于制备防治鼻咽癌的复发和转移的制剂；所述的反义寡核苷酸的序列是ACAGCCAACUCCAUGGUUAUGUA。

2.根据权利要求1所述的应用方法，其特征在于，所述的制剂是将EBV-miR-BART10的反义寡核苷酸负载到多聚赖氨酸修饰的硅纳米颗粒上制成纳米球。

3.根据权利要求2所述的应用方法，其特征在于，

多聚赖氨酸修饰的硅纳米颗粒是运用OP-10、环己烷、氨水的微乳液自组装技术进行硅纳米颗粒的合成，并利用硅纳米颗粒的表面能和离子静电作用进行多聚赖氨酸表面修饰，制备得到。

4.根据权利要求3所述的应用方法，其特征在于，制备所述的多聚赖氨酸修饰的硅纳米颗粒的方法为：

1)将OP-10、环己烷和氨水混合，室温搅拌均匀后加入正硅酸乙酯，继续搅拌至聚合完成，加入等体积丙酮，超声分散，离心，双蒸水洗涤三次，离心收集沉淀于80℃干燥，研细得粒径范围10-50nm的硅纳米颗粒；其中H₂O与OP-10及H₂O与正硅酸乙酯的摩尔比为2～10、氨水浓度为1.6～28％、正硅酸乙酯在环己烷中的摩尔浓度为0.1～3mol/L；

2)将硅纳米颗粒按0.1～10mg/mL重悬于0.6M NaCO₃溶液中，超声分散，离心，弃上清，再将沉淀物按0.1～10mg/mL重悬于pH 7.4的PBS中，超声分散，加多聚赖氨酸，终浓度为4～15nmol/mL，充分混匀，室温混摇；离心，弃上清，沉淀按0.1～10mg/mL重悬于双蒸水中，得到多聚赖氨酸修饰的硅纳米颗粒。

5.根据权利要求3或4所述的应用方法，其特征在于，将多聚赖氨酸修饰的硅纳米颗粒超声分散，每毫升纳米颗粒悬液加入10～50μg EBV-miR-BART10反义寡核苷酸，混合，室温静置使其结合。